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- Microsatellite markers for the giant kelp macrocystis pyriferaPublication . Alberto, F.; Whitmer, A.; Coelho, N. C.; Zippay, M.; E, Varela-Álvarez; Raimondi, P. T.; Reed, D. C.; Serrão, EsterWe report the isolation and characterization of 16 microsatellite loci to study the population genetics of the giant kelp, Macrocystis pyrifera. Markers were obtained by screening a genomic library enriched for microsatellite motifs. Of the 37 primer pairs defined, 16 amplified clean polymorphic microsatellites and are described. These loci identified a number of alleles ranging from three to forty (mean = 16.5, and gene diversity ranging from 0.469 to 0.930 (mean = 0.774). The isolation and characterization of these highly polymorphic markers will greatly benefit much needed studies on the molecular ecology of this important macroalga.
- Análise e caracterização da expressão e papel funcional dos potenciais genes da família 2 GPCRs no protostómio Caenorhabditis elegansPublication . Coelho, Nelson Alexandre Castilho; Power, Deborah; Cardoso, João CarlosOs receptores da família 2 GPCR (G Protein Coupled Receptors) e seus péptidos ligandos são um dos principais sistemas endócrinos (receptor-hormona) de vertebrados com elevado interesse terapêutico. Recentemente, em invertebrados, membros potencialmente orfãos desta família foram identificados in silico e estudos sobre a sua origem e função poderão contribuir para uma melhor compreensão do estabelecimento, regulação e papel fisiológico do par hormona-receptor. Neste trabalho, foram isolados e caracterizados receptores da família 2 GPCR em Caenorhabditis elegans utilizando comparações in silico, ensaios funcionais in vitro e in vivo na presença de péptidos humanos e com diferentes concentrações de cálcio no meio. Os três receptores identificados são homólogos em sequência aos receptores CAL/CGRP e CRF de vertebrados. Análises in silico sugerem que foram originados através de dois processos de duplicação de genes que ocorreram em nemátodes sendo o receptor CelZK643.3 potencialmente mais semelhante ao gene ancestral que lhes deu origem. Estudos de expressão sugerem que estes receptores são biológicamente activos e possuem um papel importante no ciclo de vida do nemátode sendo expressos ao longo das diferentes fases do seu desenvolvimento. Estudos in vivo e in vitro indicam que os receptores CelC13B9.4 e CelZK643.3 poderão ter funções fisiológicas semelhantes sendo estimulados na presença dos péptidos hAMY e hPTH e elevadas concentrações de cloreto de cloreto de cálcio, enquanto que a expressão do receptor CelC18B12.2 foi completamente inibida podendo este ter adquirido funções distintas após a sua origem.