Browsing by Author "Salim, Mariana Galvan"
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- Perspectivas sobre polihidroxialcanoatos em microrganismos extremófilos: busca de genes relacionados a PHA e acúmulo de PHA em microrganismos halófilos recuperados de uma salina interiorPublication . Salim, Mariana Galvan; Egas, Conceição; Galvão, HelenaO uso de plásticos derivados de petróleo é uma problemática global para o meio ambiente, com esforços crescentes para mitigar seus efeitos. Estudos sobre bioplásticos, como os polihidroxialcanoatos (PHA), têm ganhado destaque. Estes poliésteres são similares aos plásticos convencionais, todavia são biocompatíveis, biodegradáveis e renováveis. Microrganismos halófilos dentro dos domínios Archaea e Bacteria já foram identificados como sintetizadores destes biopolímeros e enzimas participantes de vias metabólicas de PHA também. O presente trabalho teve como objetivo identificar em 7 estirpes de haloarquéias isoladas de uma amostra de um cristalizador da Salina de Rio Maior, Portugal, o acúmulo de PHA e a busca por genes relacionados ao metabolismo de PHA a partir do metagenoma da mesma amostra. A potencialização do acúmulo de PHA foi testada a partir de glicose ou glicerol, sendo esta detectada a partir de glicose. A detecção de grânulos de PHA nos isolados próximos de Halobacterium salinarum e uma nova espécie a ser descrita, "Halorubrum miltondacostae", foi possível através de micrografias de TEM e da coloração por Sudan Black B. A detecção de PHB nas estirpes de Haloarcula marismortui e "Halorubrum miltondacostae" foi confirmada a partir do ensaio do ácido crotónico. A extração de PHA foi realizada a partir de 6 metodologias distintas, destacando-se a extração de PHB utilizando SDS 0.1% ou água destilada como as mais eficazes. A detecção dos genes foi realizada a partir da busca destes no metagenoma e a comparação contra o Genbank corroborou a identificação da função dos genes. Foram detectados genes associados a vias metabólicas em representantes dos domínios Bacteria e Archaea. Genes codificantes para PhaA, PhaB, PhaC, PGAPs e de proteínas relacionadas a mobilização de PHA (PhaJ e PhaZ) foram detectados em Gammaproteobacteria e Rhodobacteraceae. Esses resultados destacam o potencial dos halófilos como produtores de PHA e a diversidade genética envolvida nesse processo.