Browsing by Author "Diniz, Catarina Mateus"
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- Avaliação de métodos de deteção de genótipos de cianobactérias produtoras de cianotoxinas em amostras ambientaisPublication . Diniz, Catarina Mateus; Reis, Margarida P.; Palma, Patrícia Alexandra Dias BritoAs cianobactérias, bactérias aquáticas fotossintéticas, têm a capacidade de formar densas florescências, conhecidas como “Cyanobacteria Harmful Algal Blooms” (CyanoHABs). Estes levam ao decréscimo da qualidade da água, pela acumulação de escumas superficiais e por originarem eventos tóxicos, visto que muitas espécies podem produzir substâncias nocivas biologicamente ativas (cianotoxinas). As cianotoxinas, como cilindrospermopsina (CYN) e saxitoxina (STX), têm uma vasta gama de mecanismos de toxicidade, como efeitos hepatotóxicos, neurotóxicos, citotóxicos e genotóxicos. Este grupo de moléculas pode ser quantificado por métodos de ELISA, HPLC ou LC-Ms/Ms, métodos que devido ao elevado custo comprometem a sua utilização regular em processos de monitorização. A presença no fitoplâncton de espécies toxigénicas pode ser detetada através de genes especificamente associados à produção de toxinas. Por exemplo, a biossíntese de CYN é codificada por genes do grupo (cluster) cyr e a de STX depende do cluster de genes sxt. Por outro lado, vários autores têm referido a sensibilidade de alguns bioindicadores, utilizados em avaliação ecotoxicológica, como Thamnocephallus platyurus e Daphnia magna a estes agentes químicos de stress. Assim, o objetivo deste trabalho foi estabelecer uma associação entre ferramentas toxicológicas e a deteção de genótipos toxigénicos, cyr e stx, no sentido de avaliar os riscos ambientais associados aos CyanoHABs, de uma forma mais rápida e economicamente viável. Usou-se DNA extraído a partir de amostras ambientais frescas e preservadas, e de isolados de culturas, testando diferentes primers específicos para cyr ou sxt na amplificações de fragmentos daqueles genes. A presença de amplicões específicos para estes genes foi comparada com os dados ecotoxicológicos obtidos. Sendo a deteção transcriptómica da expressão destes operões ainda demasiado dispendiosa, e não garantindo a presença de genes a sua expressão, a associação das ferramentas ecotoxicológicas à deteção de genótipos toxigénicos parece ser um procedimento eficaz para ajudar a prever riscos associados a CyanoHABs.
