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Estudo da função das proteínas MOB1 e ASPM na progressão da mitose
datacite.subject.fos | Ciências Médicas::Ciências da Saúde | pt_PT |
dc.contributor.advisor | Tavares, Álvaro | |
dc.contributor.author | Ablyazizov, Seyar | |
dc.date.accessioned | 2018-12-18T17:30:40Z | |
dc.date.available | 2018-12-18T17:30:40Z | |
dc.date.issued | 2018-05-25 | |
dc.date.submitted | 2017 | |
dc.description.abstract | Os genes da família MOB (Mps One Binder) são muito conservados entre as espécies. A quantidade de genes MOBs aumenta com a complexidade dos organismos. Por exemplo, em levaduras há dois tipos de MOB enquanto em humanos há sete MOBs diferentes. Neste estudo focamos no gene MOB1. O MOB1 é o supressor tumoral que tem duas proteínas distintas MOB1A e MOB1B com homologia de 95%. O MOB1 faz parte da via Hippo que é a reguladora do crescimento dos órgãos. Além disso, o MOB1 faz parte da via MEN (Mitotic Exit Network) que força as células sair da mitose e promove a correta divisão celular (citocinese). Todos os trabalhos feitos à volta do MOB1 consideram MOB1A e MOB1B como as proteínas com funções idênticas. Os trabalhos do nosso laboratório, por RNAi, mostram que MOB1A e MOB1B têm algumas funções em comum e outras funções especificas de cada um deles. Para aprofundar os estudos e dada a penetrância incompleta dos ensaios por RNAi, torna-se necessário obter linhas celulares sem os genes de MOB1A e/ou MOB1B (clones nulos). Neste trabalho foi usada a tecnologia CRISPR/Cas9 com a inserção da sequência de interesse (HDR) pela recombinação homologa para criar os clones nulos do MOB1. Foram identificados clones nulos (desativação dos dois alelos) e heteroalelicos (desativação de um alelo) dos MOB1A e MOB1B com abordagem por PCR. A análise das linhas nulas permitiu observar diferentes fenótipos para MOB1A e MOB1B. A imunofluorescência realizada nos clones nulos e heteroalelicos permitiu identificar as pontes de cromatina entre as células e identificar células gigantes. Estas observações confirmam divisões incompletas e má segregação cromossómica. Além disso, foram confirmados os resultados obtidos do trabalho anterior das células tratadas com RNAi para MOB1A e/ou MOB1B. Em conclusão, este trabalho permitiu descobrir as possíveis funções dos MOB1A e MOB1B que regulam os checkpoints do ciclo celular, que afetam a estabilidade do fuso mitótico e progressão da citocinese. | pt_PT |
dc.identifier.tid | 202024709 | pt_PT |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.1/12227 | |
dc.language.iso | por | pt_PT |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ | pt_PT |
dc.subject | Proteínas | pt_PT |
dc.subject | MOB1 | pt_PT |
dc.subject | ASPM | pt_PT |
dc.subject | Mitose | pt_PT |
dc.title | Estudo da função das proteínas MOB1 e ASPM na progressão da mitose | pt_PT |
dc.type | master thesis | |
dspace.entity.type | Publication | |
rcaap.rights | openAccess | pt_PT |
rcaap.type | masterThesis | pt_PT |
thesis.degree.grantor | Universidade do Algarve. Departamento de Ciências Biomédicas e Medicina | |
thesis.degree.level | Mestre | |
thesis.degree.name | Mestrado em Oncobiologia - Mecanismos Moleculares do Cancro | pt_PT |