Publication
Cited2 in mouse embryonic fibroblasts reprogramming
| datacite.subject.fos | Ciências Médicas::Outras Ciências Médicas | pt_PT |
| dc.contributor.advisor | Bragança, José | |
| dc.contributor.author | Alves, André Filipe Baltazar | |
| dc.date.accessioned | 2016-05-27T15:26:41Z | |
| dc.date.available | 2016-05-27T15:26:41Z | |
| dc.date.issued | 2014 | |
| dc.date.submitted | 2014 | |
| dc.description | Dissertação de Mestrado, Ciências Biomédicas, Departamento de Ciências Biomédicas e Medicina, Universidade do Algarve, 2014 | pt_PT |
| dc.description.abstract | Células diferenciadas podem ser reprogramadas de modo a voltarem a ser pluripotentes e se transformarem em outros tipos de células através da inserção de factores específicos. No entanto a reprogramação de células somáticas de modo a se obter células estaminais pluripotentes induzidas (iPS), tem um tempo de reprogramação é relativamente longo, a eficiência da reprogramação ainda é relativamente baixa, alguns dos factores de pluripotencia que são usados para este processo são pro-oncogenes, e ainda existe a dificuldade de ultrapassar a senescência. Através de células embrionárias fibroblasticas de ratinho (MEF’s) o objectivo é reprogramar com os 4 factores de transcrição idenficados como genes de pluripotencia, Sox2, Nanog, Klf4 e c-Myc, acrescentando o mais um factor de transcrição Cited2 e usando estas células nas passagens P2 e P4. O Cited 2 é um regulador de transcrição de genes envolvido em muitas cadeias de transcrição biológicas, sendo esta capaz de induzir a proliferação das células quer de ratinhos como de humanos, é considerado um “anti-senescente”, tem a capacidade de activar a transcrição dos genes envolvidos na pluripotencia. Para este trabalho foram criados vectores virais, dois retrovírus, sendo um deles o Cited2 de modo a ser sobreexpresso nas células contendo GFP acoplada (KRK1), outro apenas com GFP que servirá de controlo (LZRS) e dois lentivírus que permitiram a inserção e activação da transcrição dos 4 factores de Yamanaka (respectivamente TET STENCCA e M2RTTA). Serão analisadas morfologias das colonias obtidas através da reprogramação, serão feitos qRT-PCR às colonias de modo a se perceber se expressão os factores de pluripotência das células estaminais embrionárias (ESC), e se através da formação de corpos embrionários (EB’s) através das iPS obtidas estas são capazes de dar origem às três linhas germinativas, mesoderme, ectoderme e endoderme, este processo será realizado por qRT-PCR. Após análise dos resultados obtidos, pode-se concluir, que o Cited2 nas MEF’s P2 possibilita o aparecimento precoce dos agregados de colónias em relação às MEF’s que não têm Cited2 exógeno, enquanto nas MEF’s P4 com Cited2 sobreexpresso, consegue-se ultrapassar a senescência e obter-se iPS com valores bastante semelhantes entre si a nível da transcrição dos factores de pluripotencia (Nanog, Sox2, Oct4 e Rex1). | pt_PT |
| dc.identifier.tid | 202137805 | |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.1/8353 | |
| dc.language.iso | por | pt_PT |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ | pt_PT |
| dc.subject | Células estaminais embrionárias | pt_PT |
| dc.subject | Células estaminais pluripotentes induzidas | pt_PT |
| dc.subject | Células embrionárias de ratinho | pt_PT |
| dc.subject | Cited2 | pt_PT |
| dc.subject | Factores de transcrição | pt_PT |
| dc.subject | Factores de pluripotencia | pt_PT |
| dc.title | Cited2 in mouse embryonic fibroblasts reprogramming | pt_PT |
| dc.type | master thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| rcaap.rights | openAccess | pt_PT |
| rcaap.type | masterThesis | pt_PT |
| thesis.degree.grantor | Universidade do Algarve. Departamento de Ciências Biomédicas e Medicina | pt_PT |
| thesis.degree.level | Mestre | pt_PT |
| thesis.degree.name | Mestrado em Ciências Biomédicas | pt_PT |