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Síntese de Biosílica em fibras de policaprolactona, produzidas por electrospinning, a partir da imobilização de Cys-tag Silicateína-α
| datacite.subject.fos | Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e Tecnologias | pt_PT |
| dc.contributor.advisor | Müller, Werner E.G. | |
| dc.contributor.advisor | Leitão, J. M. | |
| dc.contributor.author | Carvalheira, Margarida de Carvalho Pereira | |
| dc.date.accessioned | 2016-06-01T11:52:49Z | |
| dc.date.available | 2016-06-01T11:52:49Z | |
| dc.date.issued | 2014 | |
| dc.date.submitted | 2014 | |
| dc.description | Dissertação de Mestrado, Engenharia Biológica, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2014 | pt_PT |
| dc.description.abstract | Os polímeros sintéticos têm excelente biocompatibilidade e estabilidade mecânica adequada para aplicações in vivo, por esta razão estes materiais têm sido muito utilizados como scaffolds para engenharia de tecidos. A biosílica proporciona uma superfície morfogenéticamente ativa dos scaffolds para o crescimento e mineralização de células do osteossarcoma humano (SaOS-2) e pode ser sintetizada pela enzima silicateina-α. Neste trabalho é apresentada uma estratégia de imobilização da enzima Cys-tag silicateina-α em fibras de policaprolactona (PCL) produzidas por eletrospinning, para posterior síntese de biosílica. As fibras de PCL, obtidas por electrospinning, foram submetidas a aminólise com fim a favorecer a imobilização da enzima. A aminólise foi comprovada por espectroscopia de infravermelho (IV) por transformada de Fourier (FTIR) com uma banda em 1567 cm-1 correspondente à vibração de alongamento do grupo amina. Para a imobilização, as fibras de PCL-NH2 foram incubadas com a enzima Glu-tag silicateína-α (203 μg/mL) expressa pelo vetor pBAD/gIII A, inserido na estirpe E. coli TOP10, e induzida por L-arabinose (0,2%). O resultado desta imobilização, determinado por coloração de anticorpo, foi insatisfatório. Para nova imobilização, as fibras de PCL foram revestidas com uma fina camada de ouro, através do método sputter coating e imobilizadas com a enzima Cys-tag slicateína-α (73 μg/mL), expressa pelo vetor pTrc-His2/2 inserido na estirpe E. coli BL21 e induzida por IPTG. Sendo os resultados desta imobilização, determinada por coloração de anticorpo, satisfatórios as fibras imobilizadas com Cys-tag silicateína-α foram incubadas com o substrato TEOS (250 μM). A síntese de biosílica foi confirmada através da caracterização química por MEV-EDX. | pt_PT |
| dc.identifier.tid | 202227430 | |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.1/8371 | |
| dc.language.iso | por | pt_PT |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ | pt_PT |
| dc.subject | Biosílica | pt_PT |
| dc.subject | Fibras de PCL | pt_PT |
| dc.subject | Electrospinning | pt_PT |
| dc.subject | Silicateína-α | pt_PT |
| dc.title | Síntese de Biosílica em fibras de policaprolactona, produzidas por electrospinning, a partir da imobilização de Cys-tag Silicateína-α | pt_PT |
| dc.type | master thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| rcaap.rights | openAccess | pt_PT |
| rcaap.type | masterThesis | pt_PT |
| thesis.degree.grantor | Universidade do Algarve. Faculdade de Ciências e Tecnologia | pt_PT |
| thesis.degree.level | Mestre | pt_PT |
| thesis.degree.name | Mestrado Integrado em Engenharia Biológica | pt_PT |
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