Loading...
Publication
Enhancement of spermiation in meagre (Argyrosomus regius) using two administration methods of GnRHa
| Name: | Description: | Size: | Format: | |
|---|---|---|---|---|
| 1.89 MB | Adobe PDF |
Authors
Advisor(s)
Abstract(s)
Reared – produced meagre (Argyrosomus regius) males (n=15) with 4 years old were monitored and sampled, during the reproductive season for spermiation, collecting sperm and blood 5 times on May 2016. The fish were treated with gonadotropin-releasing hormone agonist (GnRHa) injection and implant (EVAc). The fish were randomly allocated in three treatments, named Control (n=5), Injection (n=5) and Implant (EVAc) (n=5). The experiment on the enhancement of sperm production was performed using GnRHa injection and implant at 15 and 50 μg GnRHa mean weight kgˉ¹ dose respectively. During this time the fish were sampling at days 0, 2, 5, 12 and 19 after treatment and sperm and blood were collected. Sperm samples were evaluated for the sperm condition (arbitrary scale), initial sperm motility (min), motility percentage (%), spermatozoa density (cell/ml) and survival at 4ºC using the common method of analysis for sperm quality and the Computer-Assisted Sperm Analysis (CASA), a system that analyses and track each spermatozoa movement. The collected blood was centrifuged to separate the plasma in order to identify the steroid hormones testosterone (T), 11-ketotestosterone (11-KT) and 17,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20β-P) using ELISA protocol. One fish per treatment was killed for histologic analysis in the last day of experiment. The obtained data from the common analysis of the sperm, CASA and the hormones were evaluated using a two-way ANOVA, with time (0, 2, 5, 12, and 19 Days) and treatment (Control, Injection and Implant) as the factors. GnRHa injection showed a short period of 2 days of effect regarding sperm production enhancement in meagre, while GnRHa implant proved to enhance the sperm production for a prolonged time. The results obtained for fish treated with GnRHa did not present statistical differences regarding the sperm quality parameters analysed both using the common methods of analysis and CASA. Furthermore, testosterone was the major steroid influencing spermiation. In conclusion, GnRHa implants seemed to be more appropriate to induce spermiation in meagre. Analysis of sperm should be conducted with accurate methods such as CASA.
Um stock de corvinas (Argyrosomus regius) machos (n=15) de 4 anos de idade foi monitorizado, sendo os indivíduos amostrados durante a estação de reprodução. Durante este período foram recolhidos esperma e sangue 5 vezes durante o mês de Maio de 2016. Os indivíduos foram separados em 3 tanques, sendo 2 deles tratados com injeções de gonadotrofina (GnRHa, n=5) e implantes de GnRHa (EVAc, n=5). Um tanque foi deixado para controlo da experiência (sem injeção, n=5). A produção seminal foi estimulada através de injeções e implantes de doses de 15 e 50 μg GnRHa por média de peso kgˉ¹, respetivamente. Durante esse período, os peixes foram amostrados nos dias 0, 2, 5, 12 e 19 depois de tratados com GnRHa, recolhendo-se amostras de esperma e sangue. As amostras de esperma foram avaliadas segundo os seguintes parâmetros: condição do esperma (escala arbitraria), mobilidade (min) e percentagem de espermatozoides móveis (%), densidade (células/ml), sobrevivência do esperma armazenado a 4ºC e Computer- Assisted Sperm Analysis (CASA). As amostras de sangue foram preparadas para a determinação das seguintes hormonas esteroides: testosterona (T), 11-ketotestosterona (11-KT) e 17,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20β-P) através do método de ELISA. No final da experiência, foram realizadas análises histológicas às gonadas para confirmar os estados de desenvolvimento gonadal. Os resultados obtidos com as análises comuns do esperma, CASA e determinações hormonais foram submetidos a análise estatística (ANOVA de duas vias), com o tempo (0, 2, 5, 12 e 19 dias) e tratamentos (controlo, injeção e EVAc) como fatores. Observou-se que os indivíduos tratados com injeção de GnRHa apresentaram um curto efeito (2 dias) em relação a produção de esperma, enquanto que os indivíduos tratados com implantes (EVAc) sofreram um prolongamento na produção de esperma durante todo o período amostrado. Os resultados para as análises comuns e com CASA revelaram que o esperma de corvina não apresentou diferenças estatísticas em relação aos parâmetros de qualidade. Em relação aos níveis de testosterona determinados, verificou-se que esta hormona atuou como a principal hormona influenciando a espermiação. Em conclusão, os implantes de GnRHa parecem ser o tratamento mais apropriado para a indução da espermiação na corvina. A análise do sémen deve ser realizada utilizando métodos precisos, tais como o CASA.
Um stock de corvinas (Argyrosomus regius) machos (n=15) de 4 anos de idade foi monitorizado, sendo os indivíduos amostrados durante a estação de reprodução. Durante este período foram recolhidos esperma e sangue 5 vezes durante o mês de Maio de 2016. Os indivíduos foram separados em 3 tanques, sendo 2 deles tratados com injeções de gonadotrofina (GnRHa, n=5) e implantes de GnRHa (EVAc, n=5). Um tanque foi deixado para controlo da experiência (sem injeção, n=5). A produção seminal foi estimulada através de injeções e implantes de doses de 15 e 50 μg GnRHa por média de peso kgˉ¹, respetivamente. Durante esse período, os peixes foram amostrados nos dias 0, 2, 5, 12 e 19 depois de tratados com GnRHa, recolhendo-se amostras de esperma e sangue. As amostras de esperma foram avaliadas segundo os seguintes parâmetros: condição do esperma (escala arbitraria), mobilidade (min) e percentagem de espermatozoides móveis (%), densidade (células/ml), sobrevivência do esperma armazenado a 4ºC e Computer- Assisted Sperm Analysis (CASA). As amostras de sangue foram preparadas para a determinação das seguintes hormonas esteroides: testosterona (T), 11-ketotestosterona (11-KT) e 17,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17,20β-P) através do método de ELISA. No final da experiência, foram realizadas análises histológicas às gonadas para confirmar os estados de desenvolvimento gonadal. Os resultados obtidos com as análises comuns do esperma, CASA e determinações hormonais foram submetidos a análise estatística (ANOVA de duas vias), com o tempo (0, 2, 5, 12 e 19 dias) e tratamentos (controlo, injeção e EVAc) como fatores. Observou-se que os indivíduos tratados com injeção de GnRHa apresentaram um curto efeito (2 dias) em relação a produção de esperma, enquanto que os indivíduos tratados com implantes (EVAc) sofreram um prolongamento na produção de esperma durante todo o período amostrado. Os resultados para as análises comuns e com CASA revelaram que o esperma de corvina não apresentou diferenças estatísticas em relação aos parâmetros de qualidade. Em relação aos níveis de testosterona determinados, verificou-se que esta hormona atuou como a principal hormona influenciando a espermiação. Em conclusão, os implantes de GnRHa parecem ser o tratamento mais apropriado para a indução da espermiação na corvina. A análise do sémen deve ser realizada utilizando métodos precisos, tais como o CASA.
Description
Dissertação de mestrado, Aquacultura e Pescas, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2017
Keywords
Reprodutores Temporada reprodutiva Espermatogênese Espermiação Controlo endócrino Hormônios esteroides GnRH