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An efficient procedure to extract RNA from a single Aphis gossypii and Aphis spiraecola for detecting Citrus tristeza virus by nested RT-PCR

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A simple protocol to extract RNA from a single wingless aphid, Aphis gossypii and Aphis spiraecola, using liquid nitrogen and Tri-Reagent is described. A nested reverse-transcription polymerase chain reaction with degenerate primers enabled Citrus tristeza virus (CTV) detection in these aphid species collected from an infected tangor ‘Ortanique’ (Citrus × sinensis (L.) Osbeck × Citrus reticulata Blanco) in the field. The procedure enabled a CTV detection rate of 75% in the A. gossypii and A. spiraecola evaluated.

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Palavras-chave

Aphid CTV Detection Diagnostic RNA extraction

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