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Liver-like biosensor: immobilized CYP3A4 sensors as tools for ligand binding and enzyme activity measurements

dc.contributor.advisorFerreira, Guilherme N. M.
dc.contributor.authorRosa, Luís Filipe Morgado
dc.date.accessioned2015-03-30T11:03:27Z
dc.date.available2016-03-30T00:30:12Z
dc.date.issued2011
dc.date.submitted2011
dc.description.abstractCytochromes P450 constitute a super-family of enzymes involved in the metabolism of Xenobiotics, where human cytochrome P450 3A4 is the most abundant of all P450s, accounting for about 50% of all human liver cytochromes. This membrane anchored protein is responsible for the metabolization of a wide array of environmental drugs and intoxicants, mainly due to its haem domain properties, and active site cavity volume. These properties make this protein an excellent subject for biosensor application, although CYO3A4 enzyme is also famous for its instability. Enzyme inactivation at room temperature is a normal conversion process that this enzyme undergoes, that may hamper any biosensing approach.por
dc.description.abstractA superfamília de genes do Citocromo P450 (CYP) codifica um grupo de hemoproteínas responsável pelo metabolismo oxidativo de uma larga variedade de compostos exógenos, incluindo fármacos e carcinogéneos, e endógenos como esteróides, ácidos gordos e prostaglandinas. A forma predominante no fígado e intestinos humanos é o CYP3A4, que metaboliza um largo espectro de compostos importantes do ponto de vista clínico, fisiológico e toxicológico. Neste trabalho, a produção recombinante de E.coli do CYP3A4 foi estudada e optimizada, com vista a produzir quantidades de enzima pura e activa, suficientes para os estudos de desenvolvimento e construção de biossensores usando o CYP3A4. Para isso, os métodos clássicos de produção recombinante e purificação foram revistos e optimizadospor
dc.identifier.tid101254350
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.1/5852
dc.language.isoengpor
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.subjectEngenharia biológicapor
dc.subjectPurificaçãopor
dc.subjectEstabilidadepor
dc.subjectBio-sensorespor
dc.subjectImpedânciapor
dc.titleLiver-like biosensor: immobilized CYP3A4 sensors as tools for ligand binding and enzyme activity measurementspor
dc.typedoctoral thesis
dspace.entity.typePublication
rcaap.rightsopenAccesspor
rcaap.typedoctoralThesispor
thesis.degree.disciplineCiências Biotecnológicas (Engenharia Biológica)por
thesis.degree.grantorUniversidade do Algarve. Faculdade de Ciências e Tecnologiapt_PT
thesis.degree.levelDoutoramentopor
thesis.degree.nameDoutoramento em Ciências Biotecnológicas (Engenharia Biológica)por

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