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Publication
Genetic diversity within a wild rocket [Diplotaxis tenuifolia (L.) DC.] germplasm collection and molecular characterization of selected accessions
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Authors
Abstract(s)
Wild rocket (Diplotaxis tenuifolia (L.) DC) is a species known for its growing consumption as “baby leaf” crop. Downy mildew, a disease caused by the pathogen Hyaloperonospora sp., is one cause of production losses in D. tenuifolia cultivation. To preserve elevated quality standards and sustainable production of wild rocket, the characterization of genetic diversity present in a germplasm collection is an important step towards the identification of genetic resources, fundamental to plant breeding. The objectives of this work encompass the characterization of the genetic diversity within a germplasm collection of D. tenuifolia, including a set of E. sativa samples, and the unequivocal identification of a group of selected accessions, using molecular markers. Genetic diversity analysis, performed using 5 Inter Simple-Sequence Repeats (ISSR) and 7 Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) primers, resulted in 110 scorable polymorphisms. Wild rocket accessions exhibited intraspecific genetic similarity with values ranging between 0.697 and 0.994. Tighter clusters aggregate accessions with greater genetic similarity provided by the same producing company. The unequivocal identification of 90 accessions was performed using Simple-Sequence Repeats (SSR) and Single Nucleotide Polymorphisms (SNP) markers, the latter analyzed as Cleaved Amplified Polymorphic Sequences (CAPS). These loci were mined from the D. tenuifolia genomic assembly (UAlgDiploT.01), uploaded to the genomic databases. Twenty SSR and 19 SNP loci (selected by the presence of a TaqI restriction region in the SNP site), were retrieved for analysis. From this, five SSR and nine SNP loci were selected, giving rise to 70 SSR alleles analyzed by capillary gel electrophoresis and 36 CAPS polymorphisms. The molecular characterization of selected accessions resulted in the identification of specific fingerprints for the accessions, excluding 1 trio and 6 pairs of wild rocket accessions, exhibiting full similarity (100%). Thus, confirming the presence of duplicate accessions provided by different breeding and commercial companies.
Rúcula selvagem (Diplotaxis tenuifolia (L.) DC) é uma espécie conhecida pelo seu crescente consumo como cultura “baby leaf”. O míldio, doença causada pelo patógeno Hyaloperonospora sp., é uma causa para as perdas de produção no cultivo de D. tenuifolia. Para preservar elevados padrões de qualidade e produção sustentável de rúcula selvagem, a caracterização da diversidade genética presente numa coleção de germoplasma é um passo importante na identificação de recursos genéticos, fundamentais para o melhoramento de plantas. Os objetivos deste trabalho englobam a caracterização da diversidade genética de uma coleção de germoplasma de D. tenuifolia, incluindo amostras de E. sativa e, a identificação inequívoca de um grupo de acessos selecionados, utilizando marcadores moleculares. A análise da diversidade genética, realizada utilizando 5 primers Inter Simple-Sequence Repeats (ISSR) e 7 Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD), resultou em 110 polimorfismos contabilizados. Os acessos de rúcula selvagem exibiram elevada similaridade genética intraespecífica com valores entre 0.697 e 0.994. Grupos mais compactos agregam acessos com maior similaridade genética fornecidos pela mesma empresa produtora. A identificação inequívoca de acessos foi realizada utilizando marcadores Simple-Sequence Repeats (SSR) e Single Nucleotide Polymorphisms (SNP), estes últimos analisados como Cleaved Amplified Polymorphic Sequences (CAPS). Estes loci, extraídos do conjunto genómico D. tenuifolia (UAlgDiploT.01), foram carregados em bases de dados genómicas. Vinte loci SSR e 19 loci SNP (selecionados pela presença de uma região de restrição TaqI no sítio SNP) foram recuperados para análise. Destes, cinco loci SSR e nove SNP foram selecionados, dando origem a 70 alelos SSR analisados por eletroforese em gel capilar e 36 polimorfismos CAPS contabilizados. A caracterização molecular dos acessos selecionados resultou na identificação de “fingerprints” específicos para os acessos, excluindo 1 trio e 6 pares de acessos de rúcula selvagem, apresentando similaridade total (100%), confirmando a presença de acessos duplicados fornecidos por diferentes empresas produtoras.
Rúcula selvagem (Diplotaxis tenuifolia (L.) DC) é uma espécie conhecida pelo seu crescente consumo como cultura “baby leaf”. O míldio, doença causada pelo patógeno Hyaloperonospora sp., é uma causa para as perdas de produção no cultivo de D. tenuifolia. Para preservar elevados padrões de qualidade e produção sustentável de rúcula selvagem, a caracterização da diversidade genética presente numa coleção de germoplasma é um passo importante na identificação de recursos genéticos, fundamentais para o melhoramento de plantas. Os objetivos deste trabalho englobam a caracterização da diversidade genética de uma coleção de germoplasma de D. tenuifolia, incluindo amostras de E. sativa e, a identificação inequívoca de um grupo de acessos selecionados, utilizando marcadores moleculares. A análise da diversidade genética, realizada utilizando 5 primers Inter Simple-Sequence Repeats (ISSR) e 7 Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD), resultou em 110 polimorfismos contabilizados. Os acessos de rúcula selvagem exibiram elevada similaridade genética intraespecífica com valores entre 0.697 e 0.994. Grupos mais compactos agregam acessos com maior similaridade genética fornecidos pela mesma empresa produtora. A identificação inequívoca de acessos foi realizada utilizando marcadores Simple-Sequence Repeats (SSR) e Single Nucleotide Polymorphisms (SNP), estes últimos analisados como Cleaved Amplified Polymorphic Sequences (CAPS). Estes loci, extraídos do conjunto genómico D. tenuifolia (UAlgDiploT.01), foram carregados em bases de dados genómicas. Vinte loci SSR e 19 loci SNP (selecionados pela presença de uma região de restrição TaqI no sítio SNP) foram recuperados para análise. Destes, cinco loci SSR e nove SNP foram selecionados, dando origem a 70 alelos SSR analisados por eletroforese em gel capilar e 36 polimorfismos CAPS contabilizados. A caracterização molecular dos acessos selecionados resultou na identificação de “fingerprints” específicos para os acessos, excluindo 1 trio e 6 pares de acessos de rúcula selvagem, apresentando similaridade total (100%), confirmando a presença de acessos duplicados fornecidos por diferentes empresas produtoras.
Description
Keywords
Diplotaxis tenuifolia Diversidade genética RAPD ISSR microssatélites CAPS