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Estudo do papel biológico das elicitinas de Phytophthora cinnamomi e do seu envolvimento no processo infeccioso

dc.contributor.authorHorta, M.
dc.date.accessioned2011-09-07T16:04:57Z
dc.date.available2011-09-07T16:04:57Z
dc.date.issued2006
dc.descriptionTese dout., Biologia, Universidade do Algarve, 2006por
dc.description.abstractPhytophthora cinnamomi, oomiceta parasita das raízes de Quercus suber, excreta abundantemente cinamominas, proteínas da família das elicitinas. Foi demonstrada a interacção destas proteínas com vários tipos de moléculas lipídicas mas desconhece-se o seu papel biológico. Neste trabalho foi induzido o silenciamento do gene codificante para a β-cinamomina, após transformação genética de protoplastos por meios químicos (lipossomas e CaCl2/PEG) com uma sequência anti-sentido do gene βcin. A selecção dos transformantes foi realizada através da co-transformação com um gene que conferiu resistência à higromicina B. A presença dos transgenes foi certificada por PCR. A ausência da proteína em meios de cultura foi confirmada através de western blotting, aplicando anticorpos monoclonais anti-b- cinamomina, e a ausência do respectivo RNAm foi comprovada com quantificação por RTPCR em tempo real, observando-se também uma diminuição na expressão de genes codificantes para outras elicitinas. Testes de patogenicidade realizados em Q. suber com o único co-transformante estável obtido (resistente ao antibiótico e com gene βcin silenciado), com um transformante simples (resistente ao antibiótico) e com os respectivos isolamentos selvagens revelaram uma diminuição de patogenicidade na estirpe com o gene βcin silenciado, que não pode ser atribuída à simples presença do gene de resistência. Perfis de expressão genética obtidos por cDNA-AFLP revelaram diferenças marcantes entre co-transformante e isolamento selvagem e a sequenciação de alguns fragmentos diferencialmente transcritos revelou que estes estão potencialmente associados à expressão do gene cinβ, destacando-se entre eles um gene associado ao metabolismo de ácidos gordos.por
dc.description.sponsorshipFundação para a Ciência e Tecnologia (FCT)por
dc.formatapplication/pdfpor
dc.identifier.other576.3 HOR*Est Cave
dc.identifier.tid101155808
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.1/543
dc.language.isoporpor
dc.relationESTUDO DO PAPEL BIOLÓGICO DAS ELICITINAS DE PHYTOPTHORA CINNAMOMI E DO SEU ENVOLVIMENTO NO PROCESSO INFECCIOSO
dc.subjectTesespor
dc.subjectBiologia molecularpor
dc.subjectParasitaspor
dc.subjectPhytophthora cinnamomipor
dc.subjectQuercus suberpor
dc.titleEstudo do papel biológico das elicitinas de Phytophthora cinnamomi e do seu envolvimento no processo infecciosopor
dc.typedoctoral thesis
dspace.entity.typePublication
oaire.awardTitleESTUDO DO PAPEL BIOLÓGICO DAS ELICITINAS DE PHYTOPTHORA CINNAMOMI E DO SEU ENVOLVIMENTO NO PROCESSO INFECCIOSO
oaire.awardURIinfo:eu-repo/grantAgreement/FCT//SFRH%2FBD%2F1249%2F2000/PT
project.funder.identifierhttp://doi.org/10.13039/501100001871
project.funder.nameFundação para a Ciência e a Tecnologia
rcaap.rightsopenAccesspor
rcaap.typedoctoralThesispor
relation.isProjectOfPublication82fdb3a0-9f0b-4876-9826-ca0c87485c08
relation.isProjectOfPublication.latestForDiscovery82fdb3a0-9f0b-4876-9826-ca0c87485c08
thesis.degree.grantorUniversidade do Algarve. Faculdade de Engenharia dos Recursos Naturaispor
thesis.degree.levelDoutorpor
thesis.degree.nameDoutoramento em Biologia. Especialização em Biologia Molecularpor

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