Mecanismos moleculares e respectivas vias de sinalização intracelulares envolvidas na regulação da produção de esteróides sexuais em machos de tilápia mossambica (Oreochromis mossambicus)

Gonçalves, Filipa Alexandra Martins

http://hdl.handle.net/10400.1/3156

Use this identifier to reference this record.

Send Feedback

Authors

Gonçalves, Filipa Alexandra Martins

Advisor(s)

Martins, Rute S. T.

Canario, Adelino V. M.

Abstract(s)

Os comportamentos agressivos entre machos, originam um rápido aumento nos níveis de androgénios, levando a uma necessidade de clarificar os mecanismos que permitem esta mudança. Neste trabalho foi analisada a influência das vias de sinalização da enzima proteína quinase dependente de cAMP (cAMP-PKA), proteína quinase C (PKC) e o complexo cálcio-calmodulina (Ca2+-CaM) na produção de androgénios em testículos de tilápia (Oreochromis mossambicus). Esta análise foi feita incubando fragmentos de testículos com agonistas e antagonistas das vias referidas e analisando os níveis dos androgénios, pelo método de radioimunoensaio. Dada a influência do gene SF1 na regulação das enzimas envolvidas na esteroidogénese, e da sua relação com o gene DAX1, neste trabalho foi ainda analisada a expressão dos referidos genes. Pretendeu-se assim verificar se a sua expressão poderia explicar o efeito das manipulações das vias na produção de esteróides. O nível de expressão de ambos os genes foi analisado por PCR semi-quantitativo, utilizando como gene de referência o RNA ribossomal 18S. Os resultados obtidos para a análise da produção de esteróides revelam que, os níveis basais de testosterona e 11-cetotestosterona (11-KT) não dependem da via PKC. Contudo, estão dependentes da via cAMP-PKA, pois verifica-se uma diminuição dos níveis de ambos, quando os tecidos foram incubados com um inibidor da PKA, o SQ22536. Apesar da via PKC não ser necessária para manter os níveis basais, a indução dos níveis de androgénios pela cAMP-PKA está dependente da via PKC. Em relação à expressão dos genes SF1 e DAX1, os resultados obtidos neste trabalho não puderam ser interpretados pois a expressão do gene 18S, gene de referência, não foi constante em todos os tratamentos. Assim, será necessário, em estudos futuros, repetir a análise da expressão dos genes referidos mas utilizando outros genes de referência que não o 18S.