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Caracterização da diversidade de eucariotas fototróficos provenientes de águas ácidas de mina
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Abstract(s)
O presente trabalho teve por objetivos principais caracterizar a diversidade de
organismos fototróficos acidófilos ou acidotolerantes presentes nas águas ácidas provenientes
da drenagem ácida de mina, na Área Mineira Abandonada de S. Domingos (Mértola,
Portugal); produzir culturas unialgais de microalgas acidotolerantes e/ou acidófilas; e verificar
o potencial biotecnológico de uma estirpe isolada com base na sua caracterização fisiológica.
Procedeu-se à recolha de amostras que foram identificadas morfologicamente,
recorrendo a microscopia, e molecularmente, recorrendo a técnicas de extração de DNA, de
amplificação por PCR, de clonagem e de sequenciação, com base em marcadores como
sequências conservadas dos 18S rDNA e 23S rDNA. Identificou-se quatro géneros de
organismos fototróficos acidófilos, nomeadamente, Euglena, Coccomyxa, Chlamydomonas e
Klebsormidium, bem como diatomáceas (Bacillariopheceae). Além destes eucariotas, também
foi possível identificar, molecularmente, dois géneros de bactérias, Acidiphilium e
Variovorax.
Isolou-se duas microalgas dos géneros Coccomyxa e Chlamydomonas, em culturas
unialgais, mas não axénicas, utilizando o meio MK a pH 2.5 e recorrendo a técnicas como o
riscado à exaustão. Com o isolado de Coccomyxa sp. foi possível fazer estudos fisiológicos,
de modo a determinar os potenciais biotecnológicos desta microalga, utilizando como alvos a
acumulação de carotenóides e a produção malondialdeído (MDA). Verificou-se a taxa de
crescimento desta microalga em dois níveis de pH diferentes (2.5 e 6.5/7.0), duas fontes de
azoto (ureia - MKU e nitrato - MK) e em duas intensidades luminosas diferentes. A
combinação entre o pH 6.5, a intensidade luminosa mais elevada e a fonte de azoto sob a
forma de nitrato proporcionou a taxa de crescimento média mais elevada. A acumulação de
carotenoides foi maior na cultura em meio MK a pH 6.5 com a intensidade luminosa elevada.
Mediu-se MDA como parâmetro indicador da indução de stress oxidativo em duas
concentrações de cobre (0.4 e 0.8 mM).
Description
Dissertação de mest., Biologia Molecular e Microbiana, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Univ. do Algarve, 2012
Keywords
Microalgas Biologia molecular Carotenoides Mina de S. Domingos