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Catálise de pontes dissulfureto pelas vias enzimáticas que atuam no retículo endoplasmático usando como substrato a proteína fluorescente HyPer

datacite.subject.fosEngenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e Tecnologiaspt_PT
dc.contributor.advisorMelo, Eduardo Xavier Pinho e
dc.contributor.authorRodrigues, Fernando Alberto Lemos
dc.date.accessioned2016-05-19T12:37:39Z
dc.date.available2016-05-19T12:37:39Z
dc.date.issued2016-02-18
dc.date.submitted2015
dc.descriptionDissertação de Mestrado, Engenharia Biológica, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2016pt_PT
dc.description.abstractO folding oxidativo de proteínas é uma modificação pos-transducional que consiste na formação de pontes dissulfureto intramoleculares pela oxidação de grupos tiol de duas cisteínas. Esta modificação química é essencial para a estabilidade das proteínas, principalmente em proteínas secretadas para o meio extracelular. In vivo, o folding oxidativo de proteínas secretadas pela célula ocorre no retículo endoplasmático e é assistido por uma série de proteínas que atuam como catalisadores. Estas reacções necessitam da presença de um aceitador final de eletrões. No presente trabalho foram estudadas duas vias enzimáticas que atuam no retículo endoplasmático. Uma via envolve um fluxo de electrões entre duas proteínas, a Endoplasmic Recticulum Oxireductase 1 (Ero1) e a Protein Disulfide Isomerase (PDI); A outra via envolve a PDI e a Peroxiredoxin IV (PRDX4). O estudo destas vias enzimáticas foi realizado in vitro e avaliado por espectros de fluorescência usando as proteínas fluorescentes Hydrogen Peroxide Sensor (HyPer), e a reduction-oxidation sensitive green fluorescent protein (roGFP) . Analisou-se as velocidades de oxidação da HyPer e roGFP com concentrações diferentes das enzimas envolvidas nas vias de modo a determinar o passo limitante destas reações redox, bem como qual destas duas vias é a mais importante. O estudo das duas vias possíveis permitiu observar que em todos os casos ocorre oxidação das proteínas fluorescente quando estão presentes todas as enzimas necessárias para a reação ocorrer Na via da PDI/Ero1 usando HyPer como sensor, a PDI desempenha um papel limitante da velocidade da reação porque a velocidade total de oxidação é mais dependente da concentração de PDI do que da de Ero1.pt_PT
dc.identifier.tid202175456
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10400.1/8287
dc.language.isoporpt_PT
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/pt_PT
dc.subjectEnzimaspt_PT
dc.subjectFolding Oxidativo de proteínaspt_PT
dc.subjectHydrogen Peroxide Sensorpt_PT
dc.subjectReduction-oxidation sensitive Green Fluorescent Protein Protein Disulfide Isomerasept_PT
dc.subjectEndoplasmic Reticulum Oxiredutasept_PT
dc.subjectPeroxiredoxinspt_PT
dc.titleCatálise de pontes dissulfureto pelas vias enzimáticas que atuam no retículo endoplasmático usando como substrato a proteína fluorescente HyPerpt_PT
dc.typemaster thesis
dspace.entity.typePublication
rcaap.rightsopenAccesspt_PT
rcaap.typemasterThesispt_PT
thesis.degree.grantorUniversidade do Algarve. Faculdade de Ciências e Tecnologiapt_PT
thesis.degree.levelMestrept_PT
thesis.degree.nameMestrado em Engenharia Biológicapt_PT

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