Browsing by Issue Date, starting with "2010"
Now showing 1 - 20 of 700
Results Per Page
Sort Options
- Bem-estar e educação pela artePublication . Pereira, Rui Lopes PenhaDe 6 a 9 de Março de 2006, teve lugar em Lisboa a Conferência Mundial sobre Educação Artística, sob os auspícios da UNESCO. Aproveitando este evento e com o fim de lançar um importante contributo para a discussão das bases da educação artística em Portugal, seguiu-se-lhe a Conferência Nacional de Educação Artística que decorreu de 29 a 31 de Outubro de 2007, no Porto, numa promoção conjunta dos Ministérios da Educação e da Cultura. De alguns documentos destas conferências ressalta a ênfase dada à criatividade artística, como elemento justificador da educação pela arte. No entanto, argumento aqui que a criatividade talvez não seja o conceito merecedor da maior centralidade, mesmo na educação pela arte, contrapondo-lhe o conceito de bem-estar. Aponto também como desenvolvimento natural do bem-estar no processo educativo, o “desinteresse” tal como interpretado na filosofia de Emmanuel Levinas. Argumento ainda que a arte parece ter de facto particularidades que podem facilitar um ambiente ético permeado por este “desinteresse” Levinasiano, não obstante o facto de tal ser igualmente possível no ensino de qualquer outro tópico. Tal deve-se ao facto de pugnar aqui pela centralidade do “processo” na educação, apontando-se o “produto” como do interesse do mais simples e restrito processo instrutivo. Finalmente, como exemplo paradigmático de uma rede de instrução pela arte onde é possível contrastar os elementos acima debatidos, refiro-me às mais de setecentas Associações Filarmónicas portuguesas, espalhadas pelo continente e ilhas.
- Biomarcadores da inflamaçãoPublication . Sequeira, Ana Luísa Marques; Pinto, RuiOs biomarcadores da inflamação têm aplicação na actualidade como umas das principais técnicas imunológicas para diagnóstico de doenças que têm como principio básico a inflamação dos tecidos e de inflamações sistémicas ou generalizadas como a sepsis. A esta classe de biomarcadores pertencem a proteína C-reactiva (PCR), o fibrinogénio, as citocinas ou interleucinas, a procalcitonina, entre outras. O facto de existirem tantas proteínas associadas ao processo inflamatório dificulta a compilação das mesmas pois esta área actualmente encontra-se em constante desenvolvimento e actualização. As proteínas de diferentes grupos e mecanismos de defesa trabalham em sintonia desempenhando papeis importantes nas diferentes fases da inflamação e isso é visível quando se observa a cinética entre estes biomarcadores. Apesar de muitas técnicas poderem ser usadas para identificar e quantificar estes marcadores, são as técnicas imunológicas que ocupam lugar de destaque como a EIA (Enzime immunoassay).
- Estudo da deterioração da gamba Parapenaeus longirostris (Lucas, 1846)Publication . Lagartinho, J.; Aníbal, J.; Esteves, E.A gamba da espécie Parapenaeus longirostris, trata-se de uma espécie largamente capturada no mar Mediterrânico nas costas de Espanha, França e Itália, sendo mesmo a espécie com mais peso comercial capturada nestas águas. O regulamento do Conselho Europeu nº 2074/2005 aponta como testes de garantia de frescura no pescado (peixe, moluscos e crustáceos) a determinação do teor de azoto básico volátil total (ABVT) e a determinação de azoto trimetilamínico (ATMA) também apontados por muitos autores como testes válidos e eficazes pelo que foram estudadas a aplicabilidade destes métodos na determinação do grau de frescura da gamba em estudo. Paralelamente foi efectuada uma avaliação sensorial e uma abordagem ao método do índice de qualidade (QIM) sendo proposta uma escala qualitativa de 14 pontos de demérito especifica para esta espécie e foi avaliada a qualidade microbiológica em termos de segurança alimentar e estudado o crescimento de alguns grupos microbianos em gamba. Pela análise dos resultados obtidos, é possível verificar a existência de uma correlação linear entre temperatura de conservação e taxa de produção de ABVT e ATMA o que permitiu a modelação da deterioração da gamba em função da temperatura de conservação o que prova a viábilidade do método. Também é apontada a ocorrência de lixiviação dos compostos voláteis (solúveis) que ocorre pelo contacto com gelo durante o seu transporte e armazenagem, como sendo o motivo para que diversos autores desacreditem estes métodos. Também foi possivel verificar a existência de uma relação linear entre crescimento microbiano e produção de compostos azotados, bem como verificar que o aumento de 10 ºC na temperatura de conservação provoca o aumento para o dobro na taxa de crescimento de bactérias psicrotróficas e de bactérias mesófilas
- Processamento de emoções realizado por sujeitos com traumatismo crânio-encefálicoPublication . Martins, Ana Teresa; Reis, Alexandra; Esteves, FranciscoO Traumatismo Crânio-Encefálico (TCE), provocado por uma força mecânica externa, é uma causa comum de lesão cerebral em populações jovens e para além das consequências físicas que podem advir deste quadro, são frequentemente observadas perturbações na esfera cognitiva, nomeadamente ao nível da linguagem, memória, atenção, e perturbações mais persistentes na esfera do comportamento emocional. Enquanto que as alterações físicas são geralmente reabilitadas pela medicina actual, as perturbações no comportamento e a sua possivel associação a um processamento inadequado de emoções, dado serem mais difíceis de avaliar e de intervir, podem persistir e ter repercursões negativas na esfera social, familiar e laboral dos sujeitos com TCE. Na última década observou-se um interesse acrescido ao nível das neurociências cognitivas por compreender este tipo de quadro. Neste contexto, têm sido desenvolvidos diferentes paradigmas experimentais aplicados a doentes com lesão cerebral que têm procurado esclarecer quais as bases neuronais subjacentes ao processamento de emoções e ao comportamento social. Com o objectivo de compreender o que muitos autores têm vindo a estudar no campo das relações entre cérebro, processamento de emoções e comportamento social, realizámos quatro estudos que pretenderam contribuir para uma melhor compreensão do processamento de emoções em sujeitos com TCE frontal e a sua possivel relação com as funções executivas e o desajustamento social: 1) Reconhecimento de expressões faciais representativas de emoções básicas; 2) Reconhecimento de expressões faciais representativas de emoções sociais; 3) Categorização de estados emocionais em contexto escrito; e 4) Julgamento de dilemas morais. Os resultados dos estudos foram convergentes ao reflectirem uma desvantagem dos sujeitos com lesões frontais relativamente a sujeitos saudáveis ao nível do processamento de emoções, sobretudo emoções de valência negativa e no julgamento de determinadas acções morais nomeadamente as acções com maior intensidade emocional. Foi igualmente verificada uma associação entre o nivel de desajustamento social e o reconhecimento visual de emoções sociais. Os resultados são igualmente sugestivos da existência de uma dissociação entre o desempenho cognitivo e o desempenho emocional nos participantes TCE, isto é, enquanto as capacidades cognitivas e a capacidade de avaliar estimulos neutros se mantêm intactas nestes sujeitos, o processamento de determinadas emoções encontra-se deficitário. Esta dissociação parece apoiar a existência de um circuito neuronal específico para o processamento de emoções.
- Laminaria ochroleuca Bachelot de la Pylaie canopy effect on intertidal understorey benthic assemblages in northern PortugalPublication . Barradas, Ana; Alberto, F.; Serrão, Maria Ester Tavares ÁlvaresThe canopy effect of the kelp Laminaria ochroleuca on the associated species assemblages was studied at a northern Portugal intertidal kelp bed, by doing a removal experiment of kelp individuals inside plots of 0.25 m2. The understorey assemblages in undisturbed plots with the same area were sampled for comparison as well as the assemblages inside the holdfasts from the removed kelps. A total of 238 taxa was identified, from which 77 belonged to macroalgae and 161 to invertebrate fauna. The holdfasts showed an average number of 35 epibiont species per holdfast, and several exclusive species when compared to the bottom samples. The understorey assemblage was composed essentially by highly branched red algae and Annelids, Nematods and Arthropods. There was a temporal variability in the assemblages from April to August and an interaction effect between factors time and canopy for algal biomass, but there was no significant interaction for these factors for invertebrate fauna. There was a significant effect of the factor canopy on algal total species, as well as for faunal biomass, faunal species richness and fauna total species. The removal of the canopy did not seem to produce an effect on the recruitment density of its gametophytes. The results seem to respond to changes in light availability and space, with an increase in coarsely and finely branched macroalgae, that represent an increase in habitable space for invertebrate fauna. There was an increase in the number of invertebrate fauna taxa after canopy removal, with an increase in filter and deposit feeding species. The removal of the dominant species in this ecosystem seems to influence the physical structure of the environment, with consequences on the composition of the associated community.
- Effect of postarvest elicitors on ‘fuyu’ persimmon quality during cold storagePublication . Sautter, Cláudia K.; Neuwald, Daniel A.; Sestari, Ivan; Saquet, Adriano A.; Rizzatti, Mara R.; Malmann, Carlos A.; Brackmann, Auri; Nunes, CarlaTo induce resveratrol synthesis and reduce skin browning in ‘Fuyu’ persimmons, fruit were treated directly after harvest with the following elicitors: UV irradiation, ozone, phosphonate, or acibenzolar-S-methyl and then kept for three months at -0.5 °C in air storage at around 95% relative humidity. Traces of transresveratrol were detected in the skin of the persimmons at harvest, but after treatment and cold storage this compound was not found. After shelf-life (storage plus 5 d at 20 °C), the soluble solids content (SSC), reducing and non-reducing sugars and total polyphenols were not significantly influenced by any of the elicitor treatments. Fruit treated with ozone showed a higher reducing sugar content but developed skin damage, flesh browning and small internal cavities. These results were correlated with the skin colour. Fruit treated with acibenzolar-S-methyl had the highest flesh firmness and total polyphenol content. However, this treatment had a higher skin browning index after shelf-life.
- Dissection of the early steps in the assembly of the 20S proteasome in Saccharomyces cerevisiaePublication . Matias, Ana Catarina Parreira Peres; Ramos, Paula; Dohmen, JürgenO sistema ubiquitina/proteassoma é o principal sistema de degradação proteica nas células eucariotas. Proteínas desnecessárias, que já cumpriram a sua função na célula, ou malformadas, devido a um determinado factor de stress, são encaminhadas para degradação. Primeiro são marcadas com cadeias de ubiquitina pela acção de três tipos de enzimas diferentes, E1 (enzima de activação da ubiquitina), E2 (enzima de conjugação da ubiquitina) e E3 (enzima de ligação ubiquitina-proteína). As proteínas ubiquitiladas são depois reconhecidas e degradadas pelo proteassoma 26S. A maioria dos péptidos resultantes é rapidamente degradada em aminoácidos por proteases citosólicas podendo ser depois utilizados na síntese de novas proteínas. A ubiquitina, por sua vez, é reciclada pela acção de enzimas de desubiquitilação associadas ao proteassoma 26S. Esta protease de 2000 kDa é composta pelo núcleo catalítico chamado de proteassoma 20S (CP) e pelas partículas reguladoras 19S (RP). Enquanto que o proteassoma 20S é responsável pela degradação proteica, as partículas reguladoras são responsáveis pelo reconhecimento, desenrolamento e translocação da proteína a ser degradada para o interior do proteassoma 20S. Esta partícula é composta por catorze subunidades distintas organizadas num cilindro de quatro anéis sobrepostos, contendo sete subunidades cada na disposição 1-7 1-7 1-7 1-7. As subunidades que apresentam actividade catalítica são 1, com actividade pós-acídica, 2 com actividade acídica e 5 com actividade quimiotríptica. Estes sítios activos estão localizados no interior do proteassoma 20S e portanto protegidos do meio intracelular. Apesar de ser conhecida a estrutura do proteassoma 20S em eucariotas, a forma como as 28 subunidades se associam de modo a formar uma estrutura funcional ainda não é totalmente clara. Trabalhos recentes revelaram que a montagem do proteassoma 20S é um processo ordenado que envolve vários chaperones moleculares. Estas espécies constituem um grupo diversificado de proteínas que assistem o folding e unfolding e a montagem e desmontagem de estruturas macromoleculares mas não fazem parte destas estruturas quando estão a desempenhar a sua função na célula. Em levedura, estas proteínas são Ump1 e os heterodímeros Poc1-Poc2 e Poc3-Poc4. Estes complexos apenas são funcionais quando na sua forma dimérica. Considera-se que a montagem do proteassoma é iniciada pela formação de um anel-composto por sete subunidades diferentes com a ajuda dos chaperones Poc1- Poc2 e Poc3-Poc4. Esta estrutura serve como plataforma para a incorporação do chaperone molecular Ump1 e das subunidades . A primeira a ser incorporada é a subunidade 2, seguida pelas subunidades 3 e 4. Nesta etapa, o heterodímero Poc3-Poc4 abandona a montagem e as subunidades 5, 6 e 1 são incorporadas, formando-se assim uma metade proteassomal ou complexo 15S. A junção das duas metades é promovida pela incorporação de 7. A dimerização promove a maturação do proteassoma 20S tornando-se este activo. Como consequência Ump1 e Poc1-Poc2 convertem-se nos primeiros substratos do proteassoma. É principalmente, sobre os passos iniciais desta via de montagem que é maior a falta de informação e, portanto, o objectivo deste trabalho é tentar identificar complexos que se formam durante estes passos iniciais utilizando como modelo biológico a levedura de padeiro Saccharomyces cerevisiae. Para tal, as subunidades α e β, para além dos chaperones mencionados, foram marcadas com um determinado epítopo no seu C-terminal a fim de poderem ser detectadas por immunoblotting. De modo a analisar o conteúdo proteico resultante das diferentes manipulações genéticas, várias técnicas bioquímicas foram utilizadas como a análise de proteínas por SDS-PAGE, gel nativo e a separação de complexos proteicos por cromatografia de filtração em gel. Nesta técnica as proteínas são separadas de acordo com a sua massa molecular em que os complexos maiores são eluídos primeiro e por último os complexos mais pequenos. Foram utilizadas duas colunas diferentes de acordo com o tamanho dos complexos a serem separados. A coluna Superdex-200 apresenta uma resolução máxima para complexos entre 10 e 600 kDa enquanto que a coluna Superose-6 entre 5 e 5000 kDa. Os chaperones moleculares que assistem a montagem do proteassoma 20S em levedura estão presentes em diferentes complexos intermediários. O chaperone Ump1 parece existir apenas nos complexos 15S, enquanto que Poc2 foi detectado não só neste último complexo como também em complexos de maior massa molecular, como o proteassoma 20S. As subunidades β parecem estar presentes em complexos de maior massa molecular, como o proteassoma 26, 20 e 15S enquanto que a subunidades não só estão presentes nestes complexos como também em complexos precursores, sugerindo que as subunidades poderão ser as primeiras subunidades a incorporar em complexos precursores. De acordo com o nosso trabalho apenas as subunidades 1, 2 e 4 parecem existir em complexos precursores sugerindo a sua existência em complexos iniciais. Contudo, os complexos precursores contendo a subunidade 4 mereceram a maior atenção neste trabalho. Para entender um pouco melhor os complexos 4, o conteúdo proteico das fracções de filtração em gel foi analisado num gel nativo tendo sido identificados dois complexos precursores compostos pela subunidade 4 que parecem seguir uma ordem de montagem. Neste trabalho, várias experiências foram desenhadas a fim de caracterizar estes complexos precursores, denominados apenas por complexos 4. Ao sobrexpressar 4 em levedura observou-se uma acumulação de complexos 4, curiosamente sem provocar um aumento na quantidade de proteassomas 26 e 20S. Em bactéria, a sobrexpressão de 4 revelou uma acumulação de complexos contendo 4 nas fracções onde tipicamente são eluídos os complexos 4 em levedura na coluna Superdex200 (fracções 24, 25 e 26). Estas observações sugerem que 4 tem tendência a formar oligómeros. A marcação da subunidade 4 com o epítopo GFP no seu C-terminal teve como objectivo provocar um aumento significativo (cerca de 30 kDa) na sua massa molecular. Quer por filtração em gel, quer por gel nativo, os típicos complexos 4, normalmente detectados por volta dos 150 kDa, desapareceram para originar complexos de maior massa molecular, sugerindo que os complexos 4 poderão ser constituídos por mais do que uma subunidade 4. A purificação dos complexos 4 envolveu a marcação da referida subunidade com epítopo FLAG no seu C-terminal. Num primeiro passo todos os complexos contendo 4 foram purificados utilizando uma resina anti-FLAG. Num segundo passo os complexos 4 foram separados dos outros complexos proteassomais por cromatografia de filtração em gel. O material eluído nas fracções 25 e 26 foi concentrado, analisado por SDS-PAGE, corado com prata e analisado por espectrometria de massa. A subunidade 4 foi identificada, como esperado, bem como os chaperones moleculares Ssa2 e Sse2 e outras proteínas aparentemente não relacionadas com o proteassoma (RNAse, Cdc25, gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase, isopropil malato desidrogenase). Devido às suas propriedades de chaperones moleculares, Ssa2 e Sse2 foram considerados candidatos a participarem na montagem do proteassoma. A família de chaperones Hsp70, do inglês heat shock proteins of 70 kDa, é a mais abundante e melhor estudada. Assistem uma vasta gama de processos celulares como a montagem de complexos proteicos tanto em condições de stress como em condições normais. O seu mecanismo de acção consiste num ciclo de ligação/libertação da proteína-substrato conduzido pela mudança entre um estado de baixa afinidade para o ATP e um estado de elevada afinidade para o ADP. Este ciclo é controlado tanto por co-chaperones da família Hsp40 (Ydj1), que dirigem os Hsp70 para os seus substratos, como por factores permutadores de nucleótidos que determinam o tempo de vida do complexo Hsp70-substrato. Estes factores permutadores são chamados de NEF, do inglês Nucleotide Exchange Factor. Os chaperones moleculares da família Hsp110 foram recentemente descritos como factores permutadores de Hsp70. Estas duas famílias de chaperones são estruturalmente muito semelhantes entre si mas ao contrário de Hsp70, Hsp110 não parece estar envolvida no folding proteico. Parece sim actuar como holdases, de modo a manter a solubilidade das proteínas desnaturadas. Em levedura, as proteínas Ssa1 (stress-seventy subfamily A), Ssa2, Ssa3 e Ssa4 são membros da família Hsp70 enquanto que Sse1 (stress-seventy subfamily E) e Sse2 representam a família Hsp110. Estas duas famílias de chaperones moleculares são essenciais para a viabilidade celular demonstrando o seu importante papel na célula. Métodos bioquímicos e genéticos foram usados para demonstrar que os chaperones Hsp110 e Hsp70 são novos factores que promovem a montagem do proteassoma 20S. Porque a delecção conjunta dos membros de cada família de chaperones é inviável, os complexos 4 foram analisados individualmente nos mutantes sse1Δ, sse2Δ e ssa1-ts (ssa1ts ssa2Δ ssa3Δ ssa4Δ) para avaliar o efeito da inexistência desses genes na montagem do proteassoma. Apesar da análise dos complexos 4 por filtração em gel não mostrar diferenças significativas nos mutantes analisados, a sua análise num gel nativo revelou ser mais evidente. Sse2 não parece afectar a formação dos complexos 4 ao contrário de Sse1 e Hsp70. Nos mutantes sse1Δ e ssa1-ts para além de não detectarmos o complexo 4 de menor mobilidade electroforética num gel nativo, foi detectado a existência de um novo complexo 4, denominado i de intermediário. Curiosamente, o complexo 4 de maior mobilidade electroforética, chamado de complexo 4 0, não parece ser afectado pela ausência destes chaperones. Os chaperones Sse1 e Ssa1 existem num complexo com aparentemente a mesma mobilidade que o complexo 4 de menor mobilidade electroforética num gel nativo. Face a estas observações, Sse1 e Ssa1 parecem estar presentes neste complexo juntamente com 4 sendo este denominado de c para indicar o complexo com chaperones. O mutante ssa1-ts possui os genes SSA2, SSA3 e SSA4 deletados e uma mutação sensível à temperatura no gene SSA1. Esta última mutação faz com que a estirpe seja viável pois alguma proteína Ssa1 funcional é expressa, o que seria de esperar a formação de complexo 4 c. No entanto, sabese que esta proteína mutante consegue interagir com Sse1 mas estes complexos possuem diferentes características quando comparados com o complexos wild-type Sse1-Ssa1. Estas diferenças poderão explicar a inabilidade da proteína mutante Ssa1-ts em promover a formação de complexo 4 c. Continuando a busca por evidências que suportem a existência de Sse1 e Hsp70 no complexo 4 c, foi analisado o efeito da adição de nucleótidos, ATP ou ADP, sabendo que estes promovem a associação de Sse1 a Ssa1. A adição de nucleótidos promove a formação de complexo 4 c portanto suportando a ideia da existência de Sse1 e Hsp70 no complexo 4 c. Curiosamente, a adição da proteína Sse1 ao extracto proteico de sse1Δ, promoveu a formação do complexo 4 c com o concomitante desaparecimento do complexo 4 i, apoiando a ideia da existência de Sse1 no complexo 4 c. Os mutantes sse1Δ e ssa1-ts revelaram dificuldades no crescimento a 30 ºC e sensibilidade a elevadas temperaturas (37 ºC), que é um efeito esperado devido às suas características de proteínas de choque térmico. O mutante sse1Δ demostrou alguma resistência à droga 4NQO, característica esta típica de mutantes que afectam a biogénese do proteassoma. Contudo, esta observação não se verificou para o mutante ssa1-ts. Na tentativa de obter efeitos mais acentuados, sse1Δ foi combinado com mutantes que por si só apresentam defeitos na montagem do proteassoma, ump1Δ, 3Δ, poc1Δ ou poc3Δ. Os duplos mutantes 3Δ sse1Δ, poc3Δ sse1Δ e ump1Δ sse1Δ exibiram dificuldades acrescidas no crescimento a 30 ºC, sugerindo que a delecção do gene SSE1 acentuou as dificuldades na montagem do proteassoma dos mutantes individuais. Por outro lado, esta observação não foi verificada para poc1Δ sse1Δ. Esta diferença está de acordo com a ideia de que Poc1 e Poc3 estão envolvidos em diferentes passos na montagem do proteassoma. Como 3, Ump1 e Poc3 estão envolvidos na montagem do proteassoma, estas observações sugerem um papel para Sse1 na biogénese do proteassoma. Apesar dos efeitos verificados ao nível do crescimento celular, os duplos mutantes não revelaram efeitos extra ao nível dos complexos 4. A sobrexpressão de Sse1 nas células de levedura não teve qualquer impacto no crescimento celular mas revelou diferenças ao nível dos complexos 4. Para além do desaparecimento do complexo 4 c, foi identificado um novo complexo precursor de menor mobilidade electroforética, o que apoia a existência de um papel na montagem do proteassoma para Sse1. A subunidade 3 é a única subunidade proteassomal não essencial, sendo as restantes necessárias para a viabilidade celular. Em alternativa à delecção de genes, a expressão dos genes que codificam para algumas subunidades proteassomais essenciais foram regulados recorrendo-se à substituição dos seus promotores nativos por outros reguláveis, o promotor GALS. Na presença de galactose no meio de crescimento, a subunidade regulada é sobrexpressa mas na presença de glucose esta expressão é reduzida, fazendo com que a expressão da subunidade alvo seja shut-down ou “desligada”. Assim foi possível parar a formação do proteassoma no passo imediatamente antes da incorporação da subunidade sob o controlo do promotor GALS, e analisar os vários complexos intermediários que existiam na célula na ausência da subunidade em estudo. O shut-down das subunidades 1, 2, 4 e 6 têm efeitos distintos na montagem do proteassoma, visto que foi observada a acumulação de diferentes complexos precursores. Curiosamente, o shut-down da subunidade 2 demonstrou a acumulação de um complexo precursor aparentemente constituído apenas pela subunidade 4 visto que nenhuma outra subunidade foi identificada num complexo com a mesma mobilidade electroforética. Esta observação sugere que os complexos 4 não conseguem prosseguir uma via normal de montagem sem a presença de 2. Reunindo os resultados obtidos neste estudo, foi proposto um modelo para a formação do anel-. Neste modelo a montagem do proteassoma começaria com a formação de um complexo formado por várias subunidades 4 que corresponderia ao complexo 4 0. Com a ajuda de Sse1 e Hsp70, este complexo seria convertido noutro complexo precursor chamado de complexo 4 c. Na ausência de Sse1, o complexo 4 c não se poderia formar, formando-se antes um complexo intermediário i. Como perspectiva futura seria interessante descobrir qual a função de Sse1 e Hsp70 na montagem do proteassoma e qual a constituição dos complexos 4 0, i e c. Ainda existem muitas questões em aberto mas os resultados obtidos neste trabalho contribuíram para compreender melhor a montagem do proteassoma. Observou-se que as subunidades parecem ser as primeiras subunidades a serem incorporadas na montagem do proteassoma e depois as subunidades β. De todas as subunidades , apenas 1, 2 e 4 parecem ser responsáveis pela formação dos complexos iniciais. Foi identificado um complexo precursor constituído por 4, Sse1 e Hsp70 o que confere uma nova função à família de chaperones moleculares Hsp70 e Hsp110, o envolvimento na biogénese do proteassoma. Com a compreensão dos detalhes da via de montagem do proteassoma 20S poder-se-á estudar o efeito de fármacos que regulem a síntese do proteassoma, e que se tornarão relevantes no tratamento de anomalias patológicas onde o proteassoma se encontra envolvido, como por exemplo o cancro ou doenças neurodegenerativas.
- Relationship between postharvest diseases resistance and mineral composition of citrus fruitPublication . Nunes, C.; Duarte, Amílcar; Manso, T.; Weiland, C.; Garcia, J. M.; Cayuela, J. A.; Yousfi, K.; Martínez, M.C.; Salazar, Miguelreen and blue moulds, due to the pathogenic action of Penicillium digitatum and Penicillium italicum respectively are the main cause of orange losses during postharvest. Under Mediterranean climate conditions, both together are responsible for 80% of total postharvest citrus fruit decay. The type of orchard production system, field location with different types of climate and soil has a main influence on mineral composition of fruits. The mineral composition of fruits can have a significant impact on fruit quality and shelf life during postharvest period. These include effects on fruit colour, texture, disease susceptibility, juice composition and development of physiological disorders. Oranges from different regions from South of Spain and Portugal and from three different production systems (conventional, integrated and organic) were studied to evaluate whether both factors (origin and production system) affected the degree of fruit sensitivity to decay. Results indicate that the sensitivity to green or blue mould is determined better by the origin of fruit than by the system of production.
- Comunicação matemática num contexto de resolução de problemasPublication . Coelho, Vasco João dos Santos; Amado, NéliaEste estudo visa compreender como alunos do 9.º ano fazem uso de representações para comunicar matematicamente num contexto de resolução de problemas, considerando, simultaneamente, o papel do discurso desenvolvido entre os vários actores, na sala de aula. Assim, formularam-se as seguintes questões de investigação: i) A que representações matemáticas recorrem os alunos quando se envolvem em actividades de resolução de problemas? ii) Qual o papel desempenhado por estas representações nos processos de resolução de problemas e de comunicação dos seus raciocínios? iii) De que modo as interacções discursivas ocorridas durante as actividades de resolução de problemas influenciam o processo de resolução? O quadro teórico articulou diferentes focos, destacando-se: o processo de comunicação, em geral, e a comunicação na aula de matemática, em particular, o discurso matemático e as representações do conhecimento matemático. O trabalho de campo contemplou uma intervenção pedagógica com dez alunos de 9.º ano, nas aulas de Estudo Acompanhado, durante a qual foram propostas dez tarefas. Esta intervenção, ao fomentar e valorizar a comunicação reflexiva e instrutiva, deu aos alunos oportunidades de falarem, ouvirem, discutirem e reflectirem, colocando ênfase na capacidade de comunicar em Matemática. Adoptou-se uma metodologia qualitativa, de carácter interpretativo, centrada na análise de dados recolhidos através de observação participante, de entrevistas aos alunos e das suas produções. Os resultados evidenciam que a resolução de problemas constituiu uma boa estratégia para promover a comunicação matemática, uma vez que estimulou o aparecimento de diversas representações, que foram progressivamente melhoradas, facilitou o confronto de ideias, a delineação de estratégias e a apresentação de resultados, quer na forma escrita quer oral. O discurso que foi emergindo no contexto das aulas, e que se tornou cada vez mais proficiente, permitiu uma clara evolução na execução das tarefas
- First record of Ocinebrina nicolai (Mollusca: Gastropoda: Muricidae: Ocenebrinae) in North-Eastern Atlantic watersPublication . Afonso, Carlos; Bonomolo, Giuseppe; Monteiro, Pedro; Bentes, Luis; Oliveira, Frederico; Veiga, Pedro; Rangel, Mafalda; Sousa, Inês; Leite, Laura; Gonçalves, J. M. S.Ocinebrina nicolai Monterosato, 1884 a marine mollusc belonging to the Muricidae family is reported from Algarve, south coast of Portugal for the first time and is a new record for the biodiversity of the Portuguese malacological fauna and northeastern Atlantic waters. This species with a medium-size shell for the genus (14–16 mm) was initially sampled during a baseline project that studied marine biotopes in the central Algarve region. This short note presents a brief diagnosis of the species, provides local information on geographical distribution, habitat, and compares it with other congeneric species found in Portugal: Ocinebrina aciculata (Lamarck, 1822) and Ocinebrina edwardsii (Payraudeau, 1826).
- O trabalho colaborativo e as práticas curriculares na articulação vertical do currículo de matemática do Ensino BásicoPublication . Sancho, Luís Andrade Correia; Gonçalves, Fernando RibeiroO processo de articulação curricular desenvolvido num agrupamento de escolas deve considerar sempre em primeira instância a natureza do trabalho do professor. O trabalho colaborativo, a gestão curricular, as concepções que cada um tem da disciplina de matemática e o modelo de organização condicionam/promovem um processo transparente, de partilha e de desenvolvimento profissional que conduzirão invariavelmente a que, os jovens alunos beneficiem de processos de educação que estejam bem ligados entre si, cujas influências não se neutralizem, mas que se complementem mutuamente, conduzindo, no seu conjunto a oportunidades educativas ricas e polivalentes. Um dos objectivos da nossa reflexão consiste em efectuar um diagnóstico da situação actual relativamente ao trabalho já desenvolvido ou que se prevê desenvolver nas escolas/agrupamentos, no que concerne à problemática da articulação curricular da matemática ao longo dos três ciclos do ensino básico. O nosso modelo inicial passou então por várias etapas. Com recurso aos testes estatísticos respectivos, as hipóteses de trabalho foram confirmadas, verificando-se evidência estatística para validarmos o modelo explicativo teórico. Em função da dinâmica do modelo explicativo emergente, construiu-se um novo instrumento que possibilitou uma observação que melhor compreenda e possa posteriormente intervir ao nível da natureza do trabalho colaborativo e das práticas curriculares. Para cada uma das etapas evolutivas do modelo, a técnica de observação utilizada foi a do questionário, os quais foram sujeitos aos respectivos testes. O processo de recolha de dados passou no modelo explicativo teórico por um grupo de 20 professores conhecedores desta realidade. O modelo explicativo emergente passou a uma amostra alargada de professores colocados em escolas dos concelhos de Faro, Olhão, Loulé e São Brás de Alportel o que totalizou 152 questionários recepcionados.
- Pomegranate (Punica granatum L.): A medicinal plant with myriad biological properties - A short reviewPublication . Miguel, Maria Graça; Neves, M. A.; Antunes, Maria DulceThe pomegranate, Punica granatum L., which can be found throughout the Mediterranean region, in Southeast Asia, California and Arizona in USA was in ancient times referred as possessing powers of fertility, abundance and good luck (fruit). The biological properties of extracts (antimicrobial, antioxidant, anticancer, anti-inflammatory, among other properties) obtained from several parts of pomegranate is reported in the present work. Due to such properties, the extracts have been used in therapeutics, such as in the prevention of infection, inflammation, cancer, among other applications. However, other aspects are also referred in the present work such as the good practices of culture and fruit preservation, search of new compounds, selection of cultivars through biotechnological techniques for obtaining juice or fruits ready to eat. Such compilation of information was based on the search in the ISI Web of Knowledge (Thomson Reuters) from 2009 up to the beginning of October 2010.
- Estudantes do ensino superior e comportamentos de risco face ao VIH/SIDA: a realidade da Universidade do AlgarvePublication . Preto, Pedro Augusto Rodrigues; Jesus, Saul Neves deOs múltiplos parceiros sexuais e as relações sexuais desprotegidas por parte dos jovens, aumentam exponencialmente o risco de contrair infecção por VIH, assim como outras doenças sexualmente transmissíveis. Estes dados contribuem para o facto de presentemente a SIDA ser considerada a quarta causa de morte a nível mundial para pessoas entre os 15 e os 24 anos (UNICEF, 2002). Como afirma Kalichman (1995), esta é uma patologia à qual se associa frequentemente a adopção de certos comportamentos de risco, sendo que a alteração destes comportamentos é a principal forma de prevenção. Neste estudo foram aplicados três questionários, aos alunos do 4º ano dos cursos de Enfermagem, Psicologia e Gestão, pertencentes aos quadros da Universidade do Algarve. Os instrumentos utilizados foram o Questionário de Caracterização dos Estudantes Universitários (adaptado de Mourão e Torgal, 2000), o Questionário de Conhecimento do VIH (versão portuguesa traduzida e adaptada por Cruz, 1998) e o Questionário de Comportamentos e Atitudes de Prevenção Face à SIDA (desenvolvido e adaptado por Cruz, 1994). As hipóteses estabelecidas para esta investigação foram: A idade da primeira relação sexual está correlacionada com o nível de conhecimentos dos estudantes inquiridos. Os conhecimentos sobre VIH estão directamente relacionados com a percepção de poder vir a estar infectado. As variáveis sócio demográficas influenciam os conhecimentos sobre VIH. A análise da percepção de poder vir a estar infectado(a) com o vírus da SIDA, varia de acordo com os comportamentos e a orientação sexual Este estudo permitiu obter alguns resultados interessantes e que convergem com outras investigações realizadas, como por exemplo o facto de os alunos de Enfermagem terem obtido médias de respostas correctas (M=36,78), bastante superiores às obtidas pelos alunos de Gestão (M=32,05). É também de destacar o facto de 32 indivíduos continuarem a pensar.
- A tourism research agenda for PortugalPublication . Silva, João Albino; Rodrigues, Paulo M. M.; Mendes, Júlio; Pereira, Luis NobreThe need to direct research towards the tourism industry is related to the increasingly competitive environment it fi nds itself in, especially in terms of services rendered, having grown more complex in the features and critique that comprise the tourist experience, and as economic and social agents become more selective regarding both demand and supply. Possessing information and the proper understanding of the real needs of information users and those responsible for public and private decision-making processes at the action and intervention levels becomes a fundamental issue for sustainable tourism growth and its statement for international competitiveness. This paper proposes a tourism research agenda for Portugal in order to guide future developments towards the industry’s needs.
- Saberes e sabores em Garcia da Orta, Rabelais e PlatinaPublication . Costa, Luísa Manuel Batista; Carvalho, Ana Alexandra; Carvalho, João CarlosA alimentação é um fenómeno social que pode ser considerado como o espelho da mentalidade de uma época. No século XVI, foram vários os escritores que inseriram nas suas obras preceitos de dietética e cenas de banquetes onde imperava a convivialidade. Entre esses autores estão Rabelais, com Pantagruel e Gargantua, Garcia da Orta, com os Colóquios dos Simples e Drogas e Cousas Medicinais da Índia e Bartolomeo Platina, com o De Honesta Voluptate et Valetudine. Os três escritores utilizam como principal processo retórico-poético a constante referência ao prazer provocado pela comida e pela bebida, fazendo-nos entrar nos ideais da filosofia epicurista. No entanto, a alimentação não tem como finalidade única a de saciar apetites, ela tem, igualmente, propriedades terapêuticas. Dá-se, deste modo, grande importância à teoria dos humores, baseada num sistema de correspondência entre os elementos do universo, o temperamento do ser humano e a natureza dos alimentos, considerando que estes últimos têm a virtude de, se ingeridos de forma adequada, serem um dos principais motores para uma vida saudável.
- Uma abordagem de matabolómica no estudo comparativo do metabolismo de glucose e galactose no patogénico humano Streptococcus pneumoniaePublication . Maio, Maria Teresa; Neves, Ana Rute; Ribeiro, VeraO Streptococcus pneumoniae (ou pneumococos) é um organismo Gram-positivo e patogénico causador de doenças graves, tais como pneumonia, bacteremia e meningite e outras menos graves mas mais prevalentes tais como otites. O seu habitat natural são as mucosas da nasofarínge, onde co-existe com outra microbiota humana sem causar doença. A transição de organismo comensal a patogénico apenas ocorre quando os pneumococos invadem componentes normalmente estéreis das vias respiratórias. Durante esta progressão entre nichos ecológicos as bactérias são forçadas a adaptar-se às diferentes condições nutricionais encontrados em cada nicho. Entre os vários nutrientes, os açúcares têm um papel preponderante na fisiologia de pneumococos. Este microrganismo é estritamente fermentativo, gerando energia para crescer e se multiplicar durante a conversão de açúcares a piruvato através da via glicolítica. Posto isto, é mais do que razoável imaginar um papel importante dos açúcares na capacidade de S. pneumoniae causar doença invasiva. Este trabalho tem por objectivo estudar o metabolismo de dois açúcares, a glucose e a galactose, que se sabem estar presentes em dois dos nichos frequentados por S. pneumoniae, o sangue e a nasofarínge, respectivamente. A primeira tarefa consistia em obter o perfil de crescimento de pneumococos estirpe R6 em ambos os açúcares (1% m/v) num meio quimicamente definido. Contudo, e embora várias tentativas, não se conseguia obter perfis de crescimento reprodutíveis. Todas as culturas eram inoculadas com uma pré-cultura crescida durante a noite nas mesmas condições da cultura principal, e iniciadas pela adição de cultura stock da estirpe R6 guardada em glicerol a -80ºC. Uma caracterização detalhada da cinética do crescimento das pré-culturas permitiu concluir que a irreprodutibilidade observada nos crescimentos das culturas principais se devia principalmente ao facto de se utilizar como inóculo pré-culturas em fases distintas do crescimento. Uma vez identificado o problema, fixaram-se condições de preparação e recolha da pré-cultura (fase exponencial tardia) que permitiram então uma caracterização detalhada dos parâmetros de crescimento nos dois açúcares. Sumariamente, S. pneumoniae tem a capacidade de crescer quer em glucose quer em galactose como fontes únicas de energia, mas a glucose permite taxas de crescimento mais elevadas. Enquanto que o metabolismo da glucose é tipicamente do tipo homoláctico, a galactose induz um desvio metabólico a uma fermentação de ácidos iii mistos, com produção de formato, acetato e etanol além de lactato. Este padrão pode em parte explicar-se pela diminuição da actividade (cerca de 8 vezes) de desidrogenase do lactato, em células crescidas em galactose. Já a actividade de cinase do piruvato é idêntica nos dois açúcares. Uma análise completa do metabolismo não é possível sem determinar os conteúdos intracelulares em cada condição. A análise de metabolitos in vitro requer que a amostra utilizada para o efeito reflicta o estado metabólico de interesse. Para tal, a inactivação instantânea (quenching celular) do metabolismo é essencial. Quando a separação de metabolitos intracelulares e extracelulares é um requisito, é necessário garantir que o procedimento de quenching celular não afecte a integridade celular. Por outro lado, sabe-se que métodos de extracção apresentam desvantagens, tais como a degradação e a insolubilidade de metabolitos específicos. Para cada organismo, têm que se optimizar e validar métodos de quenching celular e extracção de metabolitos. Que nos estejamos conscientes, este procedimentos experimentais nunca foram aplicados a S. pneumoniae. Assim sendo, grande parte deste trabalho de tese consistiu em testar diferentes procedimentos de quenching celular (metanol a -20ºC, solução aquosa a 60% de metanol a -40ºC, 60% de metanol em solução de 0,85% de carbonato de amónio (pH 5,5) a -40ºC), bem como diferentes métodos de extracção (perclórica, etanólica a quente, e metanólica). Concluímos que as três soluções de quenching celular testadas afectaram a integridade celular resultando em perdas significativas de metabolitos; no que respeita aos tipos de extracção, a extracção perclórica revelou ser a mais promissora para estudos futuros. Tendo em conta estes resultados, testámos também um método em que os procedimentos de quenching celular e de extracção ocorrem num só passo, pela mistura rápida de uma solução fria de ácido perclórico com cultura celular. São apresentados resultados preliminares relativos a alguns metabolitos glicolíticos. Discute-se a necessidade de testar novos métodos e/ou optimizar os aqui já utilizados para quenching celular e/ou extracção de metabolitos em S. pneumoniae.
- Sub-produtos de desinfecção da água: síntese e caracterização espectroscópica, implementação de metodologias analíticas e estudo da actividade genotóxicaPublication . Rebola, Marlene da Conceição Calça; Cardoso, Ana Sofia; Antunes, Alexandra; Silva, Maria João; Miguel, Maria GraçaDesenvolveu-se um método sintético para a preparação de um padrão clorado do benzo[a]pireno, num sistema bifásico (água e n-hexano) utilizando como agente de cloração NaOCl na presença de um catalisador de transferência de fase em meio ácido, com um rendimento de 96%. Paralelamente, recorreu-se a um método que envolveu a utilização de CuCl2 em CCl4, permitindo isolar o produto com um rendimento de 82%. Ambos os métodos conduziram à formação do 6-Cl-BaP, caracterizado por espectrometria de massa, espectroscopia de UV e fluorescência e 1H-NMR, tendo-se recorrido a espectros de correlação homonuclear de protão (COSY) para a atribuição de sinais. Aos compostos, benzo[b]fluoranteno e benzo[k]fluoranteno, aplicaram-se os mesmos métodos de síntese, mas não foi possível preparar nenhum derivado clorado, possivelmente devido à elevada estabilidade química destes compostos. A estabilidade do 6-Cl-BaP em solução estudada a 37ºC por RLC e 1H-NMR, parecem indicar a presença momentânea de uma nova espécie química que poderá resultar de alterações conformacionais ou electrónicas. Aplicou-se a metodologia SPE-RLC-FLD para quantificar o composto 6-Cl-BaP em soluções aquosas. A validação da metodologia foi efectuada através do estudo da linearidade das curvas de calibração, determinação da percentagem de recuperação, e limites de detecção e de quantificação. A percentagem de recuperação da técnica SPE foi de 84,4% e o CV (%) de 12,3%. O LDM calculado foi 0,003μg/L e o LQM foi de 0,0097 μg/L. Os efeitos citotóxicos e genotóxicos do 6-Cl-BaP e BaP foram avaliados em células HepG2 através do teste do vermelho neutro e do ensaio do cometa em condições alcalinas, respectivamente. O ensaio do cometa permitiu identificar lesões no DNA provocadas pelo 6-Cl-BaP para as concentrações 100 e 125 μM. Comparações entre concentrações equimolares dos dois agentes permitem verificar que o derivado clorado apresenta maior efeito genotóxico que o HAP não substituído, para 100 e 125 μM.
- Novel methodologies in marine fish larval nutritionPublication . Conceição, L. E. C.; Aragão, C.; Richard, Nadège; Engrola, S.; Gavaia, Paulo J.; Mira, Sara; Dias, J.Major gaps in knowledge on fish larval nutritional requirements still remain. Small larval size, and difficulties in acceptance of inert microdiets, makes progress slow and cumbersome. This lack of knowledge in fish larval nutritional requirements is one of the causes of high mortalities and quality problems commonly observed in marine larviculture. In recent years, several novel methodologies have contributed to significant progress in fish larval nutrition. Others are emerging and are likely to bring further insight into larval nutritional physiology and requirements. This paper reviews a range of new tools and some examples of their present use, as well as potential future applications in the study of fish larvae nutrition. Tube-feeding and incorporation into Artemia of 14C-amino acids and lipids allowed studying Artemia intake, digestion and absorption and utilisation of these nutrients. Diet selection by fish larvae has been studied with diets containing different natural stable isotope signatures or diets where different rare metal oxides were added. Mechanistic modelling has been used as a tool to integrate existing knowledge and reveal gaps, and also to better understand results obtained in tracer studies. Population genomics may assist in assessing genotype effects on nutritional requirements, by using progeny testing in fish reared in the same tanks, and also in identifying QTLs for larval stages. Functional genomics and proteomics enable the study of gene and protein expression under various dietary conditions, and thereby identify the metabolic pathways which are affected by a given nutrient. Promising results were obtained using the metabolic programming concept in early life to facilitate utilisation of certain nutrients at later stages. All together, these methodologies have made decisive contributions, and are expected to do even more in the near future, to build a knowledge basis for development of optimised diets and feeding regimes for different species of larval fish.
- Changes in plasma amino acid levels in a euryhaline fish exposed to different environmental salinitiesPublication . Aragão, C.; Costas, B.; Vargas-Chacoff, L.; Ruiz-Jarabo, I.; Dinis, Maria Teresa; Mancera, J. M.; Conceição, L. E. C.Previous studies have shown that Senegalese sole is partially euryhaline in the juvenile phase, being able to adapt to a wide range of salinities in a short-time period, due to changes at the osmoregulatory and metabolic level. This study aimed to assess the effects of acclimation of sole to a wide range of salinities, with a special emphasis on the role of plasma amino acids during this process. Sole juveniles were acclimated for 2 weeks to different salinities: 5, 15, 25, 38, and 55 g L−1. Plasma levels of cortisol, glucose, osmolality, and free amino acids were assessed at the end. Changes in plasma levels of cortisol, glucose, and amino acids indicate that fish reared at 5 and 55 g L−1 were facing extra energy costs. Amino acids seem to play an important role during salinity acclimation, either as energy sources or as important osmolytes for cell volume regulation.
- Assessment of sea surface temperatures (SST) and seasonal upwelling in SW PortugalPublication . Aikayo, Ndui; Newton, Alice; Icely, JohnMeteorological data such as Sea Surface Temperature (SST), Wind direction and Wind speed are important parameters to determine the occurrence of upwelling. This study demonstrates some useful techniques that can be used to provide useful meteorological data, where these may be missing from conventional data sets that are provided by, for example, national meteorological authorities. The techniques used include: Plotting the daily temperature datasets in Lines on 2Axes using EXCEL,the nearest neighbour station using Principal Component Regression in Climate Predictability Tool (CPT), calculating the skills by comparing the two datasets using SYSTAT and using FERRET satellite derived data plots to determine the missing data for a particular time. Results showed that the www.windguru.cz dataset for Sagres (SW Portugal) proved to be more suitable for replacing the missing data of temperature on the Meteorological datasets because the skills were as high as 88%, comparing with in situ data. FERRET plots also indicated suitable substitutes for non availability of the Meteorological data such as wind direction and speed. In global scenario, upwelling involves the Physical, Chemical and Biological process. Physically-like cold water on the surface because of upwelling and this affects Sea surface temperature. Wind plays an important role in regulating the Sea Surface Temperature (SST) transporting heat through the surface water. Chemically - nutrients rich water brought to the surface and Biologically-production of phytoplankton bloom that results into chlorophyll increase and this gives the resulting color change in ocean color which can be detected by satellite images. Data from the Windguru website archive and the Ferret derived plots are suitable for replacing where they are missing data on the Meteorological datasets. Details and a short review of the oceanographic and meteorological conditions that are responsible for upwelling are presented in the text.