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- Avaliação da experiência dos turistas com as farmácias do AlgarvePublication . Picoito, Carmelita Sofia Tomás Pacheco; Ramalhinho, Isabel Maria Pires Sebastião; Condinho, Mónica Sofia LealEste estudo tem como objetivo avaliar a experiência dos turistas com os serviços prestados pelas farmácias comunitárias do Algarve, tendo em vista o nível de satisfação e a qualidade do serviço prestado. Desenhou-se um estudo observacional descritivo e transversal baseado num questionário desenvolvido para o efeito, adaptado do “Patient Satisfaction With Pharmaceutical Care: Update of a Validated Instrument”. Aplicou-se o questionário, de forma oportunística, a uma amostra de turistas estrangeiros não residentes, frequentadores de, pelo menos, uma farmácia. Entre julho e setembro de 2018 participaram no estudo 128 turistas. A maioria (56,3%) são do género feminino com idade média de 53,0 anos. O grau de escolaridade mais prevalente foi o ensino secundário (53,5%), estando 65,8% dos inquiridos no ativo a nível laboral. Os inquiridos são, na sua maioria, oriundos da Europa e viajaram até ao Algarve por motivo de férias. O principal motivo de recurso à farmácia foi para efetuar uma compra (89,8%), seguida da medição de parâmetros bioquímicos (5,5%) e da solicitação de aconselhamento em saúde (4,7%). Numa avaliação global, verificou-se que os inquiridos estão “muito satisfeitos” com o espaço físico da farmácia e o respetivo atendimento prestado. Quanto à intenção de recomendação, os inquiridos responderam todos afirmativamente. A dimensão da amostra não permitiu, em grande parte dos casos, a aplicação dos testes estatísticos, no entanto, foi possível notar algumas tendências. Verificou-se que os turistas que se deslocaram à farmácia para efetuar medição de parâmetros, foram os que avaliaram pior o atendimento prestado (71,4%). Pelo contrário, os inquiridos que foram à farmácia comprar medicamentos/produtos de saúde, ou solicitar aconselhamento, assinalaram a opção “excellent” (21,7% e 50,0%, respetivamente). Na generalidade, os turistas estão bastante satisfeitos com a qualidade e profissionalismo do serviço farmacêutico português, todavia foi possível identificar algumas áreas passíveis de melhoria.
- Relatório de estágio: Hotel Waldorf Astoria AmsterdamPublication . Pegacho, Rafaela Alexandre Pedroso; Rassal, CarimoEste presente relatório relata a experiência profissional adquirida pela realização de um estágio no departamento de Housekeeping do hotel Waldorf Astoria Amsterdam, enquanto supervisor de housekeeping (Floor Supervisor). De forma a descrever melhor esta prática de estágio, o primeiro ponto retrata a revisão da literatura, dividindo-se em dois momentos distintos. O primeiro momento aborda a temática do turismo e hotelaria no mundo e, em particular, nos Países Baixos. É feito ainda uma pequena abordagem e análise do COVID-19 e o seu impacto no turismo e na hotelaria. O segundo foca-se na caracterização da entidade hoteleira onde foi realizado o estágio, descreve ainda alguns aspetos únicos associados tanto à propriedade como à marca Waldorf Astoria, tal como, aborda ainda alguns aspetos mais globais do grupo hoteleiro onde está inserido. O segundo ponto divide-se igualmente em dois momentos. O primeiro retrata o enquadramento teórico onde é abordado a temática do departamento de alojamento, consequentemente, e mais detalhada, a temática do housekeeping. São abordados desde as funções de cada membro da equipa desta seção aos procedimentos e documentos necessários ao bom funcionamento da operativa. O segundo momento deste segundo ponto é marcado pela descrição da realidade do WAA. Aborda-se mais uma vez o departamento de alojamento de uma forma muito geral, dando um maior enfoque na operativa do housekeeping. A rotina de um supervisor foi o subponto mais desenvolvido, uma vez que, o estágio tratou-se do desempenho desse cargo. Seguindo a mesma linha de pensamento, são descritas todas as outras funções dos restantes membros da equipa face a realidade no WAA, os procedimentos e standards requeridos diariamente. Para terminar este ponto são retratados os desafios e as oportunidades deste estágio e ainda o impacto procedimental do COVID-19 nos alojamentos e na rotina da operação do housekeeping. De um modo geral, conclui-se que embora a pequena dimensão do hotel a nível do número de quartos, o nível de exigência é extremamente alto, não podendo haver qualquer margem para erro, o que acarreta uma responsabilidade ainda mais acrescida dos supervisores, uma vez que, estes são os últimos a entrar num quarto antes que este seja liberto para venda. Isto por vezes, viu-se mais dificultado com a falta de uma comunicação eficaz entre seções. Contudo, a experiência foi um grande momento de aprendizagem e serviu, sem dúvida, como uma base sólida de início de carreira nesta área.
- Heterotrophic microbial communities growing in marine plastic leachates: characterization using CARD-FISH and BONCAT techniquesPublication . Amorim, Stéphanie Birnstiel Falcão; Nicastro, Katy; Castillo, Cristina RomeraMais de 5 trilhões de peças de plástico estão presentes no oceano. Seus efeitos sobre os macroorganismos estão bem documentados e sabe-se que podem afetá-los principalmente devido à sua ingestão ou emaranhamento. No entanto, os estudos sobre seus efeitos em microrganismos são menos populares e focados, principalmente, na comunidade de biofilme que pode colonizar a superfície do plástico. Foi demonstrado que os plásticos marinhos são recobertos por matéria orgânica e inorgânica, seguida da colonização bacteriana, que é dominada por Gammaproteobacteria e Alphaproteobacteria, com a possibilidade de a bactéria Bacteroidetes aparecer mais tarde e se tornar abundante. Além disso, os plásticos geralmente contêm aditivos que são adicionados pela indústria para melhorar sua qualidade e desempenho. Esses aditivos e compostos, assim como os blocos monoméricos do plástico, podem ser liberados no meio aquático com consequências para a comunidade microbiana. Verificou-se que as bactérias marinhas absorvem os compostos orgânicos liberados pelo plástico, estimulando seu crescimento. No entanto, quais grupos de bactérias são capazes de usá-los e como isso os afeta ainda é desconhecido. Nossa hipótese é que os lixiviados plásticos podem alterar e afetar a composição e atividade da comunidade de bactérias heterotróficas marinhas quando expostas a diferentes condições ambientais e tipos de plástico. Portanto, o objetivo deste estudo foi caracterizar a comunidade bacteriana e avaliar sua atividade após a exposição aos compostos liberados por diferentes tipos de plásticos. O estudo testou lixiviados de diferentes tipos de plástico comumente encontrados no oceano, como polietileno de baixa densidade (PEBD) e poliestireno (PS), sob uma variedade de condições ambientais, como diferentes temperaturas (15 e 28 °C), exposição à radiação UV e ambiente escuro. Um plástico biodegradável, ácido polilático (PLA), também foi usado para comparar com os lixiviados termoplásticos. Na etapa de fotodegradação, peças plásticas foram adicionadas à água do mar artificial (AMA) em tubos de quartzo, para tratamentos de luz, e em frascos de borosilicato revestidos com folha de alumínio, para tratamentos de escuro. Um experimento comparou PEBD e PLA a 15 °C, enquanto o outro comparou PEBD e PS a 28 °C. As amostras foram incubadas durante 6 dias sob radiação ultravioleta e luz visível e temperatura constante. Na etapa de biodegradação, lixiviados plásticos obtidos no experimento de fotodegradação anterior foram utilizados após a remoção das peças de plástico. Os lixiviados foram inoculados com um inóculo bacteriano natural do Observatório Microbial de Blanes Bay (NO Mediterrâneo). Sua curva de crescimento foi acompanhada até atingirem a fase estacionária. Em seguida, 72 horas após a inoculação, a comunidade bacteriana que foi capaz de crescer nesses lixiviados plásticos foi caracterizada pelo uso das técnicas de hibridização in situ fluorescente de deposição de repórter catalisado (CARD-FISH) e marcação de aminoácidos não canônicos bioortogonal (BONCAT). CARD-FISH é um método que usa sondas oligonucleotídicas marcadas com peroxidase de rábano (HRP) e amplificação do sinal de tiramida, a fim de detectar células com baixo conteúdo ribossômico, que são frequentemente prevalentes em águas oligotróficas. O BONCAT é um método que tem sido usado para caracterizar a atividade de micróbios não cultivados, em seu ambiente de crescimento nativo. Esta abordagem semiquantitativa explora o estado fisiológico das bactérias marinhas, incubando uma amostra bacteriana com um análogo da metionina e usando a química do clique para identificar as células que incorporaram o substrato. Sondas diferentes foram usadas para avaliar a composição da comunidade, como GAM42a, que tem como alvo a maioria das Gammaproteobacterias, CF319a, que tem como alvo muitos membros do grupo Bacteroidetes, EUB338 I-II e –III, que tem como alvo a maioria das bactérias, e Alf968, que tem como alvo as Alphaproteobacterias. Suas abundâncias foram calculadas em relação às suas contribuições para a comunidade total, enquanto sua atividade foi avaliada pelo cálculo de seu valor médio cinza (VMC), que é a soma dos valores de cinza de todos os pixels na célula dividida pelo número de pixels. Um teste-t de Student bicaudal foi aplicado a fim de comparar a abundância e a atividade dos diferentes grupos filogenéticos bacterianos. Em ambas as temperaturas, as bactérias começaram a crescer após 24 horas e atingiram a fase exponencial após 72 horas de incubação. Ao final de ambos os experimentos, as amostras de plástico apresentaram maior abundância bacteriana do que os controles sem plástico, exceto para o PS irradiado. Todos os tipos de lixiviados plásticos levaram a uma composição de comunidade microbiana semelhante: elas eram compostas principalmente por Gamma-, Alphaproteobacteria e Bacteroidetes. Ambos os experimentos apresentaram contribuições semelhantes de cada grupo filogenético para a abundância total. Gamma- e Alphaproteobacteria mostraram ser os maiores contribuintes, enquanto Bacteroidetes foi o grupo menos abundante. Os lixiviados plásticos estimularam o crescimento de Gamma- e Alphaproteobacteria nos tratamentos plásticos em relação aos controles sem plásticos. No entanto, o impacto sobre os Bacteroidetes foi mais variável. A irradiação durante a lixiviação de plástico teve resultados contrastantes na abundância bacteriana que dependeu do tipo de plástico e do grupo filogenético. No entanto, lixiviados plásticos previamente irradiados, como os encontrados no oceano, estimularam a síntese de proteínas em bactérias marinhas em relação àquelas não expostas anteriormente à radiação. Portanto, algumas exceções foram capazes de mostrar como diferentes condições e tipos de plásticos podem ter impactos mistos em cada grupo filogenético e na comunidade bacteriana. Aqui também descobrimos que o plástico biodegradável, PLA, não liberou compostos biodegradáveis que se refletiram em um maior crescimento ou atividade bacteriana. Isso mostra que, na água do mar, o plástico biodegradável como o PLA, nem sempre é biodegradado e seu impacto sobre os microrganismos não difere dos demais termoplásticos. Este estudo foi o primeiro passo para entender como os lixiviados plásticos podem afetar a composição da comunidade microbiana na coluna d'água. Também identificou, pela primeira vez, quais grupos bacterianos são selecionados nos lixiviados plásticos marinhos e o quanto eles são ativos na síntese de proteínas. As sondas aqui utilizadas levaram a uma ampla identificação de microrganismos, em grupos filogenéticos, que incluem muitas espécies diferentes. Portanto, novos experimentos são necessários para identificar os organismos que compõem cada grupo e seu comportamento quando expostos aos lixiviados plásticos em diferentes condições, pois muitos fatores intrínsecos e extrínsecos podem ter diferentes efeitos isolados e combinados sobre as bactérias. Este estudo melhorou nosso conhecimento atual sobre a interação entre a lixiviação de plástico e micróbios marinhos e como isso pode afetar o ambiente, a teia alimentar e o sistema marinhos. Esses resultados fornecem insights cruciais sobre potenciais formas de biodegradação de plástico que podem ser desenvolvidas no futuro.
- The impact of aging in mutant ataxin-2 induced neurodegenerationPublication . Lima, Patrícia Alexandra Silva; Nóbrega, ClévioCom o aumento da esperança de vida, cada vez mais aparecem doenças que previamente se desconheciam. Portanto, estas doenças não têm cura definitiva, existindo apenas terapêutica para alívio dos sintomas. As doenças neurodegenerativas inserem-se neste grupo de doenças sem cura. À medida que a idade aumenta, o cérebro é afetado pela diminuição e desregulação de certos mecanismos intra e intercelulares. É o caso da autofagia, cuja função de degradação e reciclagem de proteínas e organelos diminui durante o desenvolvimento. Nisto resulta, a acumulação de proteínas de conformação anormal e na formação de agregados proteicos que se tornam evidentes nos neurónios. As doenças de poliglutaminas são um grupo de nove doenças neurodegenerativas, que engloba a Ataxia Espinocerebelosa do tipo 2 (SCA2). A SCA2 é provocada pela expansão anormal do trato CAG que codifica para uma expansão anormal de glutaminas na proteína responsável pela patologia, ATAXINA-2. Dois achados comuns das doenças de poliglutaminas são a presença de agregados neuronais da proteína mutante nas regiões afetadas do cérebro e a desregulação do mecanismos de degradação proteica, como a autofagia. Este projeto teve como objetivo avaliar o efeito da neurodegeneração causada pela ATAXINA-2 mutante nos murganhos jovens e idosos. O aumento da idade contribuiu para um aumento na formação de agregados de ATAXINA-2 mutante e também para a perda neuronal. Os danos nas células provocados pela proteína mutada conduzem à ativação da resposta inflamatória através do recrutamento de astrócitos e ativação da microglia, que se torna mais acentuado numa idade mais avançada. Além disso, a ATAXINA-2 mutada provoca uma redução da ativação da via apoptótica e da quantidade de histonas e, possivelmente, o recrutamento do PABP para os agregados proteicos. Contudo, não foram observadas alterações nos sistemas autofágicos, mitocondriais, sinápticos e na sensitividade da regulação de nutrientes.
- How can natural compounds supplemented in eggs improve digestive efficiency in fish larvae? In ovosupplementation of spermine as promoter of early digestive system maturationPublication . Dias, Diogo Cabeleira; Engrola, Sofia; Navarro-Guillén, CarmenThe world Human population is growing, and it is expected to reach almost 10 billion until 2050. The dietary protein trends in developing countries are changing from vegetable and cereal to animal sources. The superimposition of these anthropogenic factors will, if solutions are not found, increase the pressure on the already fragilized natural resources. Aquaculture is a growing animal production sector that may be the one of the solutions for supplying the world with food, specifically marine products, while reducing the pressure on natural stocks and having the minimum impact on the environment. Nonetheless fish production has some major bottlenecks concerning, for example, sustainable feed production and fish juveniles’ supply. This is mostly due to the need to replace the typically provided live feeds with microdiets, specifically tailored to meet fish larvae´s nutritional needs, but still with constraints derived from fish larvae digestive inability to digest and assimilate the nutrients provided in these diets. For this reason, the objective of this study was to test the viability of early metabolic programing in Solea seneganelensis, a marine fish species with high commercial value, by supplementing eggs with three different amounts of spermine. Spermine, a polyamine shown to promote the maturation of the gut, was delivered through a novel technique for in ovo supplementation named sonophoresis. Each treatment was done in triplicate from egg stage until 35 days after hatching (DAH) larvae. Results demonstrate the short- and long-term safety of both, sonophoresis technique and in ovo supplementation with spermine. Regarding gut maturation, some degree of improvement in terms of lipolytic capacity were observed at 14 DAH in Sole from LOW and MED treatments. In the future, sonophoresis may become a keystone in early metabolic programing and the supplementation of spermine may generate more pronounced results if trials are conducted through longer periods and/or spermine supplementation is done through the dietary route.
- Combined effects of ocean acidification and low temperature on two range expanding hermatypic corals: Acropora solitaryenis and Porites heronensisPublication . Lugué, Klervi; Santos, Rui; Agostini, SylvainA recent poleward shift of hermatypic corals’ distribution has been reported and was attributed to the increase in sea temperature since the pre-industrial revolution. Ocean acidification and predicted increasing variability of sea surface temperatures, may together limit this shift in the future. The objective of this study was to investigate whether a tipping point exists in the physiological and metabolic responses of Acropora solitaryensis and Porites heronensis, to CO2, under average winter temperature and under cold event temperature (cold stress; -4°C decrease).We studied the effects of increased partial pressures of CO2 (pCO2) from 294 ppm to 5018 ppm, on a set of metabolic parameters. The light and dark calcification, skeletal growth rate, chlorophyll and protein concentrations decreased linearly as a function of increasing partial pCO2 in A. solitaryensis. In comparison only the dark calcification and skeletal growth rate decreased linearly as a function of increasing partial pCO2 in P. heronensis. For both species, the cold stress acted as an additional stress to the pCO2 exposure, except for the respiration in P. heronensis. No physiological tipping point has been identified, beyond which these coral species were no longer capable of carrying out the functions necessary to their survival. The lack of a clear tipping point, as well as the emergence of potential ‘ecological winners’, here P. heronensis, in the face of decreasing pH and cold temperature stress, indicate that in the coming decades the species composition of coral reefs is likely to slowly change, to a new composition in which surviving in marginal high latitudes are those that show the required potential for adaptation. Our study highlights the substantial advantages of the regression method to predict the impacts of ocean acidification. Resolving high resolution relationships between metabolism and pCO2 could greatly improve the accuracy of models describing the effects of future ocean acidification on calcifying organisms and marine ecosystems.
- O declínio cognitivo na Esclerose Múltipla Surto-RemissãoPublication . Encarnação, Maria Miguel Estima da; Reis, Alexandra; Faísca, LuísA Esclerose Múltipla (EM) é uma doença crónica, inflamatória e degenerativa, com impacto no Sistema Nervoso Central (SPEM, 2018). A disfunção cognitiva, a presença de sintomatologia depressiva e ansiosa, a escolha de estratégias de coping disfuncionais e níveis mais reduzidos de qualidade de vida têm sido reportados nestes pacientes. Objetivo: O principal objetivo deste estudo foi analisar a influência da reserva cognitiva, da sintomatologia ansiosa e depressiva, da qualidade de vida e das estratégias de coping, no declínio cognitivo em pacientes portugueses de EM do tipo surto-remissão. Método: Esta investigação contou com 23 participantes com EM do tipo surto remissão. Cada participante foi sujeito a uma avaliação neuropsicológica direcionada para o funcionamento executivo e mnésico. O declínio cognitivo foi calculado pela subtração do índice de Inteligência Pré-Mórbida às pontuações obtidas em cada teste cognitivo. Resultados: Evidenciou-se um maior declínio nas funções executivas e mnésicas. É sugerido que os pacientes de EM que denotam um maior declínio cognitivo são os menos escolarizados, que se envolvem em menos atividades de lazer, que apresentam uma pior perceção de QV, maior sintomatologia depressiva e ansiosa e que adotam estratégias de coping menos focadas na resolução do problema. Complementarmente, uma melhor QV parece associar-se a um menor índice de sintomatologia ansiosa e depressiva, uma menor adoção de estratégias de coping que procuram evitar o problema e a uma maior RC. Conclusão: Uma deteção precoce de disfunção cognitiva e de sintomatologia ansiogénica e depressiva, revela-se essencial, bem como um acompanhamento atento que instrua o paciente e promova a sua qualidade de vida. Um maior envolvimento dos pacientes em atividades dinâmicas e sociais poderá ser uma mais valia.
- Análise das potencialidades do espaço exterior: proposta de exploração com crianças em idade pré-escolarPublication . Tomé, Margarida Pereira; Gonçalves, Carla Alexandra Lourenço Duarte Rocha Dionísio; Santos, Joana Cristina Nogueira Serpa dosO presente estudo, intitulado “Análise das potencialidades do espaço exterior: proposta de exploração com crianças em idade pré-escolar”, decorreu no ano letivo 2019/2020, sendo concretizado no âmbito da unidade curricular de Prática de Ensino Supervisionada (PES), numa sala de jardim de infância do distrito de Faro, com um grupo de 15 crianças entre os 3 e os 4 anos. No sentido de analisar e refletir acerca dessas potencialidades, recorreu-se a uma metodologia qualitativa, tendo-se efetuado observação não participante dos comportamentos das crianças em momento de brincadeira livre; entrevistas semiestruturadas às educadoras e às auxiliares de ação educativa da referida instituição, com o intuito de compreender as suas perceções sobre este espaço; e uma atividade teste efetuada com as crianças. O espaço exterior foi dividido em quatro áreas comportamentais e, a partir da observação destas, definiram-se quatro situações de aprendizagem e de desenvolvimento. Posteriormente, procedeu-se a uma análise das perceções de aprendizagem das crianças, relativamente ao que foi desenvolvido, de modo a constatar a importância deste espaço enquanto promotor de desenvolvimento e de aprendizagens significativas. Concluiu-se que todos os participantes atribuem uma significativa importância a este espaço e que cada uma das atividades permitiu o desenvolvimento de inúmeras competências relevantes para o desenvolvimento motor das crianças. Além disso, este estudo permitiu conhecer a relevância atribuída a este espaço, evidenciando as suas possibilidades de aprendizagem e desenvolvimento, partindo da curiosidade inata característica de crianças em idade pré-escolar.
- Silencing ATXN2 through CRISPR-mediated insertion of a premature STOP codonPublication . Reis, Ricardo António Afonso; Matos, Carlos; Nóbrega, ClévioSpinocerebellar ataxia type 2 (SCA2) is a hereditary neurodegenerative disorder caused by expansion of CAG trinucleotide repeats present in the codifying region of the ATXN2 gene. The mutant ATXN2 product - a ataxin-2 protein with an expanded polyglutamine tract - displays a cytotoxic gain-of-function, leading to progressive neurodegeneration. No definitive therapy for this disease has yet been developed, but ATXN2 knock-down represents a promising approach. The versatility of the CRISPR-Cas system enables gene silencing at a genomic level, through an array of unprecedently diverse mechanisms. Cas nucleases guided by a single guide RNA (sgRNA) molecule produce modifications in precise regions of the DNA, and the system can be modified to direct transcriptional inhibitors such as the Krüppel-associated box domain (KRAB) to particular genetic loci. The aim of this study was to develop two ATXN2 silencing strategies, utilizing catalytically active Cas9 to knock-down the ATXN2 gene or, alternatively, a dCas9-KRAB fusion protein to pre-transcriptionally repress ATXN2 expression. One sgRNA targeting the codifying region of ATXN2 was cloned into a plasmid encoding Cas9, and another sgRNA targeting the ATXN2 promoter was cloned into a plasmid encoding dCas9-KRAB. Plasmids were transfected into human embryonic kidney (HEK) 293T cells and endogenous ATXN2 mRNA and protein levels were analyzed by qPCR and Western blot. Cas9/sgRNA did not alter ATXN2 mRNA levels in comparison to controls, contrasting with ataxin-2 protein levels that revealed a decrease tendency. dCas9-KRAB/sgRNA did not alter ATXN2 mRNA levels, but displayed a tendency for decreasing ataxin-2 protein levels, relative to non-transfected cells. Our study suggests that the CRISPR-Cas9 system may be adapted for ATXN2 gene silencing applications, but further improvements to our strategies will be necessary to produce significant alterations.
- Development of an indirect ELISA against Equine Herpesvirus Types 1 and 4Publication . Horta, Soraia Cristina Filipe; Fonseca, Filomena; Mourão, MargaridaThe equine herpesviruses are important pathogens in the animal health context, namely in the equine’s health. So far, nine types have been identified, of which herpesvirus type 1 (EHV-1) and type 4 (EHV-4) are clinically, economically, and epidemiologically the most relevant due to the pathologies associated. The main objective of this work was to develop a peptide-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for discrimination between EHV-1 and EHV-4. Selecting from the literature the immunogenic regions of both viruses, the tests were performed using a portion of glycoprotein E and a portion of glycoprotein G from each virus type. The results obtained until the conclusion of this work are promising, however, they were not conclusive. Nevertheless, they open the way for future testing, in order to make these ELISA test applicable for the detection of antibodies against EVH-1 and EHV-4.